ในโครงการก่อนหน้านี้ที่ทดสอบโรงงานแปรรูปอาหารท้องถิ่นเพื่อกำจัดยุงในประเทศไทย พบว่าน้ำมันหอมระเหยจาก Cyperus rotundus ข่า และอบเชยมีฤทธิ์ต้านยุงได้ดีต่อยุงลาย Aedes aegypti ในความพยายามที่จะลดการใช้ผลิตภัณฑ์แบบดั้งเดิมยาฆ่าแมลงและปรับปรุงการควบคุมประชากรยุงที่ต้านทาน การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อระบุศักยภาพการทำงานร่วมกันระหว่างผลการฆ่ายุงของเอทิลีนออกไซด์และความเป็นพิษของเพอร์เมทรินต่อยุงลาย Aedes aegypti รวมถึงสายพันธุ์ที่ต้านทานไพรีทรอยด์และไวต่อไพรีทรอยด์
เพื่อประเมินองค์ประกอบทางเคมีและฤทธิ์การฆ่าของ EO ที่สกัดจากเหง้าของ C. rotundus และ A. galanga และเปลือกของ C. verum ต่อสายพันธุ์ที่อ่อนไหวต่อแมลงเมืองเชียงใหม่ (MCM-S) และสายพันธุ์ที่ต้านทานต่อแมลงปางไม้แดง (PMD-R) ) ยุง Aedes aegypti ที่โตเต็มวัยที่ยังมีชีวิต ได้ทำการทดลองทางชีวภาพของยุง Aedes aegypti ในผู้ใหญ่เพื่อทำความเข้าใจฤทธิ์เสริมฤทธิ์กันของ EO สายพันธุ์ aegypti
การจำแนกลักษณะทางเคมีโดยใช้การวิเคราะห์แบบ GC-MS พบว่ามีการระบุสารประกอบ 48 ชนิดจาก EO ของ C. rotundus, A. galanga และ C. verum ซึ่งคิดเป็น 80.22%, 86.75% และ 97.24% ขององค์ประกอบทั้งหมดตามลำดับ ไซเปอรีน (14.04%) β-bisabolene (18.27%) และซินนามัลดีไฮด์ (64.66%) เป็นองค์ประกอบหลักของน้ำมัน cyperus น้ำมัน galangal และน้ำมัน balsamic ตามลำดับ ในการทดสอบการฆ่าผู้ใหญ่ทางชีววิทยา EVs ของ C. rotundus, A. galanga และ C. verum มีประสิทธิภาพในการฆ่า Ae. ค่า LD50 ของ Aegypti, MCM-S และ PMD-R คือ 10.05 และ 9.57 μg/mg ตัวเมีย, 7.97 และ 7.94 μg/mg ตัวเมีย และ 3.30 และ 3.22 μg/mg ตัวเมีย ตามลำดับ ประสิทธิภาพของ MCM-S และ PMD-R Ae ในการฆ่าตัวเต็มวัย Aegypti ใน EO เหล่านี้ใกล้เคียงกับไพเพอโรนิลบิวทอกไซด์ (ค่า PBO, LD50 = 6.30 และ 4.79 μg/mg ตัวเมีย ตามลำดับ) แต่ไม่เด่นชัดเท่าเพอร์เมทริน (ค่า LD50 = 0.44 และ 3.70 ng/mg ตัวเมีย ตามลำดับ) อย่างไรก็ตามการทดลองทางชีวภาพแบบผสมผสานพบว่า EO และเพอร์เมทรินมีการทำงานร่วมกันอย่างมีนัยสำคัญ เพอร์เมทรินมีฤทธิ์ร่วมกันอย่างมีนัยสำคัญต่อยุงลาย Aedes สองสายพันธุ์ พบ Aedes aegypti ใน EM ของ C. rotundus และ A. galanga การเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga ช่วยลดค่า LD50 ของ permethrin บน MCM-S ได้อย่างมีนัยสำคัญจาก 0.44 เป็น 0.07 ng/mg และ 0.11 ng/mg ในเพศหญิงตามลำดับ โดยมีค่าอัตราส่วนการทำงานร่วมกัน (SR) ที่ 6.28 และ 4.00 ตามลำดับ นอกจากนี้ EOs จาก C. rotundus และ A. galanga ยังช่วยลดค่า LD50 ของ permethrin บน PMD-R ได้อย่างมีนัยสำคัญจาก 3.70 เป็น 0.42 ng/mg และ 0.003 ng/mg ในเพศหญิงตามลำดับ โดยมีค่า SR ที่ 8.81 และ 1233.33 ตามลำดับ
ผลการทำงานร่วมกันของการใช้ EO-permethrin ร่วมกันเพื่อเพิ่มพิษของยุง Aedes 2 สายพันธุ์ในผู้ใหญ่ ยุง Aedes aegypti แสดงให้เห็นถึงบทบาทที่มีแนวโน้มดีของเอทิลีนออกไซด์ในฐานะตัวเสริมฤทธิ์ในการเพิ่มประสิทธิภาพในการป้องกันยุง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่สารประกอบแบบดั้งเดิมไม่มีประสิทธิภาพหรือไม่เหมาะสม
ยุงลาย (Diptera: Culicidae) เป็นพาหะหลักของไข้เลือดออกและโรคติดเชื้อจากไวรัสอื่นๆ เช่น ไข้เหลือง ไข้ชิคุนกุนยา และไวรัสซิกา ซึ่งก่อให้เกิดภัยคุกคามต่อมนุษย์อย่างมากและต่อเนื่อง[1, 2] ไวรัสเดงกีเป็นไข้เลือดออกที่ร้ายแรงที่สุดที่ส่งผลต่อมนุษย์ โดยมีผู้ป่วยประมาณ 5–100 ล้านรายต่อปี และประชากรมากกว่า 2,500 ล้านคนทั่วโลกมีความเสี่ยง [3] การระบาดของโรคติดเชื้อนี้สร้างภาระมหาศาลให้กับประชากร ระบบสุขภาพ และเศรษฐกิจของประเทศเขตร้อนส่วนใหญ่ [1] ตามข้อมูลของกระทรวงสาธารณสุขของไทย มีผู้ป่วยไข้เลือดออก 142,925 ราย และมีผู้เสียชีวิต 141 รายทั่วประเทศในปี 2558 ซึ่งมากกว่าจำนวนผู้ป่วยและผู้เสียชีวิตในปี 2557 ถึง 3 เท่า [4] แม้จะมีหลักฐานทางประวัติศาสตร์ แต่ไข้เลือดออกก็ถูกกำจัดหรือลดลงอย่างมากโดยยุงลาย หลังจากควบคุมยุงลายได้ [5] อัตราการติดเชื้อก็เพิ่มขึ้นอย่างมากและโรคก็แพร่กระจายไปทั่วโลก ซึ่งส่วนหนึ่งเป็นผลจากภาวะโลกร้อนหลายทศวรรษ การกำจัดและควบคุมยุงลาย Aedes aegypti ค่อนข้างยากเนื่องจากเป็นยุงพาหะในบ้านที่ผสมพันธุ์ หาอาหาร พักผ่อน และวางไข่ในและรอบๆ ที่อยู่อาศัยของมนุษย์ในเวลากลางวัน นอกจากนี้ ยุงลายยังมีความสามารถในการปรับตัวให้เข้ากับการเปลี่ยนแปลงของสิ่งแวดล้อมหรือการรบกวนที่เกิดจากเหตุการณ์ทางธรรมชาติ (เช่น ภัยแล้ง) หรือมาตรการควบคุมโดยมนุษย์ และสามารถกลับมามีจำนวนเท่าเดิมได้ [6, 7] เนื่องจากวัคซีนป้องกันโรคไข้เลือดออกเพิ่งได้รับการอนุมัติเมื่อไม่นานนี้และยังไม่มีการรักษาเฉพาะสำหรับโรคไข้เลือดออก การป้องกันและลดความเสี่ยงของการแพร่เชื้อไข้เลือดออกจึงขึ้นอยู่กับการควบคุมยุงพาหะและการกำจัดการสัมผัสระหว่างมนุษย์กับยุงพาหะเท่านั้น
โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การใช้สารเคมีเพื่อควบคุมยุงมีบทบาทสำคัญในด้านสาธารณสุขในฐานะองค์ประกอบสำคัญของการจัดการพาหะแบบบูรณาการอย่างครอบคลุม วิธีการทางเคมีที่ได้รับความนิยมมากที่สุด ได้แก่ การใช้ยาฆ่าแมลงที่มีพิษต่ำซึ่งออกฤทธิ์ต่อลูกน้ำยุง (สารกำจัดลูกน้ำ) และยุงตัวเต็มวัย (อะดิโดไซด์) การควบคุมลูกน้ำด้วยการลดแหล่งกำเนิดและใช้สารเคมีกำจัดลูกน้ำ เช่น ออร์กาโนฟอสเฟตและสารควบคุมการเจริญเติบโตของแมลงเป็นประจำ ถือเป็นเรื่องสำคัญ อย่างไรก็ตาม ผลกระทบต่อสิ่งแวดล้อมที่ไม่พึงประสงค์ที่เกี่ยวข้องกับยาฆ่าแมลงสังเคราะห์และการบำรุงรักษาที่ต้องใช้แรงงานมากและซับซ้อนยังคงเป็นปัญหาสำคัญ [8, 9] การควบคุมพาหะแบบแอคทีฟแบบดั้งเดิม เช่น การควบคุมยุงตัวเต็มวัย ยังคงเป็นวิธีการควบคุมที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดในช่วงที่มีการระบาดของไวรัส เนื่องจากสามารถกำจัดพาหะของโรคติดเชื้อได้อย่างรวดเร็วและในปริมาณมาก รวมถึงลดอายุขัยและอายุขัยของประชากรพาหะในท้องถิ่น [3] , 10] สารกำจัดแมลงเคมีมี 4 กลุ่ม ได้แก่ ออร์กาโนคลอรีน (เรียกสั้นๆ ว่า DDT) ออร์กาโนฟอสเฟต คาร์บาเมต และไพรีทรอยด์ เป็นพื้นฐานของโปรแกรมควบคุมแมลงพาหะ โดยไพรีทรอยด์ถือเป็นกลุ่มที่ประสบความสำเร็จมากที่สุด สารเหล่านี้มีประสิทธิภาพสูงในการกำจัดสัตว์ขาปล้องต่างๆ แต่มีประสิทธิภาพต่ำ พิษต่อสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ปัจจุบัน ไพรีทรอยด์สังเคราะห์เป็นสารกำจัดแมลงเชิงพาณิชย์ส่วนใหญ่ คิดเป็นประมาณ 25% ของตลาดสารกำจัดแมลงทั่วโลก [11, 12] เพอร์เมทรินและเดลตาเมทรินเป็นสารกำจัดแมลงไพรีทรอยด์แบบกว้างสเปกตรัมที่ใช้ทั่วโลกมานานหลายทศวรรษเพื่อควบคุมแมลงศัตรูพืชหลากหลายชนิดที่มีความสำคัญทางการเกษตรและทางการแพทย์ [13, 14] ในช่วงทศวรรษปี 1950 ดีดีทีได้รับเลือกให้เป็นสารเคมีที่เลือกใช้ในโครงการควบคุมยุงเพื่อสาธารณสุขแห่งชาติของประเทศไทย หลังจากมีการใช้ DDT อย่างแพร่หลายในพื้นที่ที่มีการระบาดของมาเลเรีย ประเทศไทยค่อยๆ ลดการใช้ DDT ระหว่างปี 1995 ถึง 2000 และแทนที่ด้วยสารไพรีทรอยด์สองชนิด ได้แก่ เพอร์เมทรินและเดลตาเมทริน [15, 16] สารกำจัดแมลงไพรีทรอยด์เหล่านี้ถูกนำมาใช้ในช่วงต้นทศวรรษ 1990 เพื่อควบคุมมาเลเรียและไข้เลือดออก โดยหลักแล้วใช้มุ้งคลุมเตียงและใช้หมอกความร้อนและสเปรย์ที่มีพิษต่ำมาก [14, 17] อย่างไรก็ตาม สารเหล่านี้ไม่มีประสิทธิภาพเนื่องจากต้านทานยุงได้ดีและประชาชนไม่ปฏิบัติตามเนื่องจากกังวลเกี่ยวกับสุขภาพของประชาชนและผลกระทบต่อสิ่งแวดล้อมจากสารเคมีสังเคราะห์ เรื่องนี้เป็นความท้าทายที่สำคัญต่อความสำเร็จของโปรแกรมควบคุมพาหะนำโรค [14, 18, 19] เพื่อให้กลยุทธ์มีประสิทธิภาพมากขึ้น จำเป็นต้องมีมาตรการตอบโต้ที่เหมาะสมและทันท่วงที ขั้นตอนการจัดการที่แนะนำ ได้แก่ การทดแทนสารธรรมชาติ การหมุนเวียนสารเคมีประเภทต่างๆ การเติมสารเสริมฤทธิ์ และการผสมสารเคมีหรือการใช้สารเคมีประเภทต่างๆ พร้อมกัน [14, 20, 21] ดังนั้น จึงมีความจำเป็นอย่างเร่งด่วนในการค้นหาและพัฒนาทางเลือกและสารเสริมฤทธิ์ที่เป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อม สะดวก และมีประสิทธิภาพ และการศึกษานี้มุ่งหวังที่จะตอบสนองความต้องการนี้
สารกำจัดแมลงจากธรรมชาติ โดยเฉพาะสารที่มีส่วนผสมของพืช แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการประเมินทางเลือกในการควบคุมยุงในปัจจุบันและในอนาคต [22, 23, 24] การศึกษาหลายชิ้นแสดงให้เห็นว่าเป็นไปได้ที่จะควบคุมยุงพาหะที่สำคัญโดยใช้ผลิตภัณฑ์จากพืช โดยเฉพาะน้ำมันหอมระเหย (EO) เป็นสารฆ่ายุงตัวเต็มวัย คุณสมบัติในการกำจัดยุงตัวเต็มวัยต่อยุงที่สำคัญบางสายพันธุ์พบได้ในน้ำมันพืชหลายชนิด เช่น ขึ้นฉ่าย ยี่หร่า ยี่หร่าฝรั่ง โป๊ยกั๊ก พริกไทย ไธม์ Schinus terebinthifolia Cymbopogon citratus Cymbopogon schoenanthus Cymbopogon giganteus Chenopodium ambrosioides Cochlospermum planchonii Eucalyptus ter eticornis . , Eucalyptus citriodora, Cananga odorata และ Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30] ปัจจุบันเอทิลีนออกไซด์ไม่เพียงแต่ถูกนำมาใช้เพียงอย่างเดียว แต่ยังใช้ร่วมกับสารจากพืชที่สกัดหรือยาฆ่าแมลงสังเคราะห์ที่มีอยู่แล้ว ทำให้เกิดพิษในระดับต่างๆ กัน การผสมยาฆ่าแมลงแบบดั้งเดิม เช่น ออร์กาโนฟอสเฟต คาร์บาเมต และไพรีทรอยด์ เข้ากับเอทิลีนออกไซด์/สารสกัดจากพืช มีผลทั้งแบบเสริมฤทธิ์หรือต่อต้านกันในการออกฤทธิ์พิษ และได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพต่อพาหะนำโรคและแมลงศัตรูพืช [31,32,33,34,35] อย่างไรก็ตาม การศึกษาส่วนใหญ่เกี่ยวกับผลพิษร่วมกันของการใช้ไฟโตเคมีคอลร่วมกับหรือไม่ใช้สารเคมีสังเคราะห์นั้นดำเนินการกับแมลงและแมลงศัตรูพืชในการเกษตรมากกว่ายุงที่มีความสำคัญทางการแพทย์ ยิ่งไปกว่านั้น งานส่วนใหญ่เกี่ยวกับผลการทำงานร่วมกันของการใช้สารกำจัดแมลงสังเคราะห์ร่วมกับพืชต่อยุงนั้นมุ่งเน้นไปที่ผลการกำจัดลูกน้ำ
จากการศึกษาครั้งก่อนซึ่งดำเนินการโดยผู้เขียนซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของโครงการวิจัยที่กำลังดำเนินการอยู่เพื่อคัดกรองสารกำจัดแมลงจากพืชอาหารพื้นเมืองในประเทศไทย พบว่าเอทิลีนออกไซด์จาก Cyperus rotundus ข่า และอบเชยมีฤทธิ์ที่อาจต่อต้านยุงลาย Aedes aegypti ตัวเต็มวัยได้ [36] ดังนั้น การศึกษานี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินประสิทธิภาพของ EO ที่แยกได้จากพืชสมุนไพรเหล่านี้ต่อยุงลาย Aedes aegypti รวมถึงสายพันธุ์ที่ต้านทานไพรีทรอยด์และไวต่อไพรีทรอยด์ ผลการทำงานร่วมกันของเอทิลีนออกไซด์และไพรีทรอยด์สังเคราะห์ที่มีประสิทธิภาพดีในผู้ใหญ่ยังได้รับการวิเคราะห์เพื่อลดการใช้ยาฆ่าแมลงแบบดั้งเดิมและเพิ่มความต้านทานต่อยุงพาหะ โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อยุงลาย Aedes aegypti บทความนี้รายงานลักษณะทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยที่มีประสิทธิภาพและศักยภาพในการเพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินสังเคราะห์ต่อยุงลาย Aedes aegypti ในสายพันธุ์ที่ไวต่อไพรีทรอยด์ (MCM-S) และสายพันธุ์ที่ต้านทาน (PMD-R)
เหง้าของ C. rotundus และ A. galanga และเปลือกของ C. verum (รูปที่ 1) ที่ใช้ในการสกัดน้ำมันหอมระเหยนั้นซื้อมาจากผู้จำหน่ายยาสมุนไพรในจังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย การระบุทางวิทยาศาสตร์ของพืชเหล่านี้ทำได้โดยการปรึกษาหารือกับนายเจมส์ แฟรงคลิน แม็กซ์เวลล์ นักพฤกษศาสตร์สมุนไพร ภาควิชาชีววิทยา วิทยาลัยวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ จังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย และนักวิทยาศาสตร์ วรรณารี เจริญทรัพย์ ในภาควิชาเภสัชกรรม วิทยาลัยเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยคาร์เนกีเมลลอน ตัวอย่างใบรับรองของพืชแต่ละชนิดจะถูกเก็บไว้ที่ภาควิชาปรสิตวิทยา คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยคาร์เนกีเมลลอน เพื่อใช้ในอนาคต
ตัวอย่างพืชแต่ละตัวอย่างถูกทำให้แห้งในที่ร่มเป็นเวลา 3-5 วันในพื้นที่เปิดโล่งที่มีการระบายอากาศที่ดีและอุณหภูมิโดยรอบประมาณ 30 ± 5 °C เพื่อกำจัดความชื้นออกก่อนสกัดน้ำมันหอมระเหยจากธรรมชาติ (EOs) วัสดุพืชแห้งแต่ละชนิดรวม 250 กรัมถูกบดให้เป็นผงหยาบด้วยเครื่องจักรและใช้ในการแยกน้ำมันหอมระเหย (EOs) โดยการกลั่นด้วยไอน้ำ เครื่องกลั่นประกอบด้วยชั้นทำความร้อนไฟฟ้า ขวดก้นกลมขนาด 3,000 มล. คอลัมน์สกัด คอนเดนเซอร์ และอุปกรณ์ Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japan) เติมน้ำกลั่น 1,600 มล. และลูกปัดแก้ว 10-15 เม็ดลงในขวด จากนั้นให้ความร้อนจนถึงประมาณ 100°C โดยใช้เครื่องทำความร้อนไฟฟ้าเป็นเวลาอย่างน้อย 3 ชั่วโมงจนกระทั่งการกลั่นเสร็จสิ้นและไม่มีการผลิต EO อีกต่อไป ชั้น EO จะถูกแยกออกจากเฟสน้ำโดยใช้กรวยแยก ทำให้แห้งด้วยโซเดียมซัลเฟตที่ปราศจากน้ำ (Na2SO4) และเก็บไว้ในขวดสีน้ำตาลที่ปิดสนิทที่อุณหภูมิ 4°C จนกว่าจะตรวจสอบองค์ประกอบทางเคมีและกิจกรรมของตัวเต็มวัย
การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยดำเนินการพร้อมกันกับการทดสอบทางชีวภาพของสารในผู้ใหญ่ การวิเคราะห์เชิงคุณภาพดำเนินการโดยใช้ระบบ GC-MS ซึ่งประกอบด้วยเครื่องแก๊สโครมาโทกราฟีรุ่น 7890A ของบริษัท Hewlett-Packard (เมืองวิลมิงตัน รัฐแคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) ที่ติดตั้งเครื่องตรวจจับแบบเลือกมวลแบบควอดรูโพลตัวเดียว (บริษัท Agilent Technologies เมืองวิลมิงตัน รัฐแคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) และ MSD 5975C (บริษัท Agilent Technologies)
คอลัมน์โครมาโตกราฟี – DB-5MS (30 ม. × เส้นผ่านศูนย์กลางภายใน 0.25 มม. × ความหนาของฟิล์ม 0.25 µm) เวลาทำงานทั้งหมดของ GC-MS คือ 20 นาที เงื่อนไขการวิเคราะห์คือ อุณหภูมิของหัวฉีดและท่อส่งคือ 250 และ 280 °C ตามลำดับ อุณหภูมิเตาเผาถูกตั้งให้เพิ่มขึ้นจาก 50°C เป็น 250°C ในอัตรา 10°C/นาที ก๊าซพาหะคือฮีเลียม อัตราการไหล 1.0 มล./นาที ปริมาตรการฉีดคือ 0.2 µL (1/10% ตามปริมาตรใน CH2Cl2 อัตราส่วนการแยก 100:1) ระบบการแตกตัวของอิเล็กตรอนที่มีพลังงานการแตกตัว 70 eV ใช้สำหรับการตรวจจับ GC-MS ช่วงการรับข้อมูลคือ 50–550 หน่วยมวลอะตอม (amu) และความเร็วในการสแกนคือ 2.91 ครั้งต่อวินาที เปอร์เซ็นต์สัมพันธ์ของส่วนประกอบแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ที่ปรับมาตรฐานตามพื้นที่พีค การระบุส่วนผสมของ EO ขึ้นอยู่กับดัชนีการคงอยู่ (RI) RI ถูกคำนวณโดยใช้สมการของ Van den Dool และ Kratz [37] สำหรับกลุ่ม n-alkanes (C8-C40) และเปรียบเทียบกับดัชนีการคงอยู่จากเอกสาร [38] และฐานข้อมูลห้องสมุด (NIST 2008 และ Wiley 8NO8) เอกลักษณ์ของสารประกอบที่แสดง เช่น โครงสร้างและสูตรโมเลกุล ได้รับการยืนยันโดยการเปรียบเทียบกับตัวอย่างที่แท้จริงที่มีอยู่
มาตรฐานการวิเคราะห์สำหรับเพอร์เมทรินสังเคราะห์และไพเพอโรนิลบิวทอกไซด์ (PBO, การควบคุมเชิงบวกในการศึกษาการทำงานร่วมกัน) ซื้อจากบริษัท Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์ รัฐมิสซูรี สหรัฐอเมริกา) ชุดทดสอบสำหรับผู้ใหญ่ขององค์การอนามัยโลก (WHO) และกระดาษที่ชุบเพอร์เมทริน (0.75%) สำหรับการวินิจฉัยซื้อจากศูนย์ควบคุมพาหะขององค์การอนามัยโลกในปีนัง ประเทศมาเลเซีย สารเคมีและสารเคมีอื่นๆ ที่ใช้ทั้งหมดเป็นเกรดวิเคราะห์และซื้อจากสถาบันในท้องถิ่นในจังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย
ยุงที่ใช้เป็นสิ่งมีชีวิตทดสอบในการทดลองทางชีวภาพของผู้ใหญ่เป็นยุงลาย Aedes aegypti ที่ผสมพันธุ์กันเองในห้องปฏิบัติการ รวมถึงสายพันธุ์เมืองเชียงใหม่ที่อ่อนไหว (MCM-S) และสายพันธุ์ปางไม้แดงที่ต้านทาน (PMD-R) สายพันธุ์ MCM-S ได้รับจากตัวอย่างในพื้นที่ที่รวบรวมได้ในพื้นที่เมืองเชียงใหม่ จังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย และได้รับการดูแลรักษาในห้องกีฏวิทยาของภาควิชาปรสิตวิทยา คณะแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ ตั้งแต่ปี 1995 [39] สายพันธุ์ PMD-R ซึ่งพบว่าต้านทานต่อเพอร์เมทริน ได้รับการแยกจากยุงทุ่งที่เก็บมาจากบ้านปางไม้แดง อำเภอแม่แตง จังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย และได้รับการดูแลรักษาที่สถาบันเดียวกันตั้งแต่ปี 1997 [40] สายพันธุ์ PMD-R ได้รับการเพาะเลี้ยงภายใต้แรงกดดันแบบเลือกเพื่อรักษาระดับความต้านทานโดยการสัมผัสกับเพอร์เมทริน 0.75% เป็นระยะๆ โดยใช้ชุดตรวจจับของ WHO พร้อมการปรับเปลี่ยนบางส่วน [41] สายพันธุ์ของ Ae. aegypti แต่ละสายพันธุ์ ยุงลาย Aedes aegypti ถูกตั้งรกรากทีละตัวในห้องปฏิบัติการที่ปราศจากเชื้อโรคที่อุณหภูมิ 25 ± 2 °C ความชื้นสัมพัทธ์ 80 ± 10% และช่วงแสงที่สว่าง/มืด 14:10 ชั่วโมง ตัวอ่อนประมาณ 200 ตัวถูกเก็บไว้ในถาดพลาสติก (ยาว 33 ซม. กว้าง 28 ซม. และสูง 9 ซม.) ที่เติมน้ำประปาที่มีความหนาแน่น 150–200 ตัวต่อถาด และให้อาหารวันละ 2 ครั้งด้วยบิสกิตสุนัขที่ผ่านการฆ่าเชื้อ หนอนตัวเต็มวัยถูกเก็บไว้ในกรงที่ชื้นและให้อาหารอย่างต่อเนื่องด้วยสารละลายซูโครสในน้ำ 10% และสารละลายมัลติวิตามินไซรัป 10% ยุงตัวเมียดูดเลือดเป็นประจำเพื่อวางไข่ ยุงตัวเมียอายุ 2 ถึง 5 วันที่ไม่ได้กินเลือดสามารถใช้ในการทดลองทางชีววิทยาของผู้ใหญ่ได้อย่างต่อเนื่อง
การทดสอบทางชีวภาพเกี่ยวกับการตอบสนองต่อปริมาณยาต่อการตายของยุงลาย Aedes aegypti, MCM-S และ PMD-R โดยใช้วิธีการทาเฉพาะที่ที่ปรับเปลี่ยนตามโปรโตคอลมาตรฐานของ WHO สำหรับการทดสอบความไว [42] EO จากพืชแต่ละชนิดเจือจางตามลำดับด้วยตัวทำละลายที่เหมาะสม (เช่น เอธานอลหรืออะซิโตน) เพื่อให้ได้ชุดความเข้มข้นที่แบ่งระดับ 4-6 ระดับ หลังจากวางยาสลบด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO2) แล้ว ให้ชั่งน้ำหนักยุงทีละตัว จากนั้นให้ยุงที่วางยาสลบนิ่งอยู่บนกระดาษกรองแห้งบนแผ่นทำความเย็นแบบกำหนดเองภายใต้กล้องจุลทรรศน์สเตอริโอเพื่อป้องกันการเกิดปฏิกิริยาซ้ำระหว่างขั้นตอน สำหรับการรักษาแต่ละครั้ง สารละลาย EO 0.1 μl จะถูกทาที่ส่วนบนของกระเพาะส่วนบนของยุงลายตัวเมียโดยใช้เครื่องจ่ายไมโครแบบมือถือ Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, USA) ยุงตัวเมียจำนวน 25 ตัวได้รับการรักษาด้วยสารแต่ละความเข้มข้น โดยมีอัตราการตายตั้งแต่ 10% ถึง 95% สำหรับความเข้มข้นที่แตกต่างกันอย่างน้อย 4 ระดับ ยุงที่ได้รับการรักษาด้วยตัวทำละลายทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม เพื่อป้องกันการปนเปื้อนของตัวอย่างทดสอบ ให้เปลี่ยนกระดาษกรองด้วยกระดาษกรองใหม่สำหรับ EO แต่ละชนิดที่ทดสอบ ปริมาณที่ใช้ในการทดลองทางชีวภาพเหล่านี้แสดงเป็นไมโครกรัมของ EO ต่อน้ำหนักตัวของตัวเมียที่มีชีวิตเป็นมิลลิกรัม กิจกรรม PBO ที่โตเต็มวัยยังได้รับการประเมินในลักษณะเดียวกับ EO โดยใช้ PBO เป็นตัวควบคุมเชิงบวกในการทดลองแบบเสริมฤทธิ์กัน ยุงที่ได้รับการรักษาในทุกกลุ่มจะถูกใส่ในถ้วยพลาสติกและให้ซูโครส 10% ร่วมกับน้ำเชื่อมมัลติวิตามิน 10% การทดลองทางชีวภาพทั้งหมดดำเนินการที่อุณหภูมิ 25 ± 2 °C และความชื้นสัมพัทธ์ 80 ± 10% และทำซ้ำสี่ครั้งกับกลุ่มควบคุม อัตราการเสียชีวิตในช่วงการเลี้ยง 24 ชั่วโมงได้รับการตรวจสอบและยืนยันโดยการไม่ตอบสนองต่อการกระตุ้นทางกลของยุง จากนั้นจึงบันทึกตามค่าเฉลี่ยของการจำลองสี่ครั้ง การทดลองซ้ำสี่ครั้งสำหรับแต่ละตัวอย่างทดสอบโดยใช้ยุงชุดต่างๆ ผลการทดลองได้รับการสรุปและนำไปใช้ในการคำนวณเปอร์เซ็นต์อัตราการตาย ซึ่งใช้ในการกำหนดปริมาณยาที่ทำให้ถึงแก่ชีวิตใน 24 ชั่วโมงโดยใช้การวิเคราะห์โปรบิต
ผลการต่อต้านการฆ่าเชื้อร่วมกันของ EO และเพอร์เมทรินได้รับการประเมินโดยใช้ขั้นตอนการทดสอบความเป็นพิษในพื้นที่ [42] ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ใช้อะซิโตนหรือเอธานอลเป็นตัวทำละลายในการเตรียมเพอร์เมทรินในความเข้มข้นที่ต้องการ รวมถึงส่วนผสมไบนารีของ EO และเพอร์เมทริน (EO-เพอร์เมทริน: เพอร์เมทรินผสมกับ EO ที่ความเข้มข้น LD25) ชุดทดสอบ (เพอร์เมทรินและ EO-เพอร์เมทริน) ได้รับการประเมินกับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R ของ Ae. Aedes aegypti ยุงตัวเมียแต่ละตัวใน 25 ตัวได้รับเพอร์เมทริน 4 โดสเพื่อทดสอบประสิทธิภาพในการฆ่าตัวเต็มวัย โดยให้การรักษาแต่ละครั้งซ้ำ 4 ครั้ง เพื่อระบุตัวเสริมฤทธิ์ EO ที่เหมาะสม จะให้ EO-เพอร์เมทริน 4 ถึง 6 โดสแก่ยุงตัวเมียแต่ละตัวใน 25 ตัว โดยให้การรักษาแต่ละครั้งซ้ำ 4 ครั้ง การรักษาด้วย PBO-เพอร์เมทริน (เพอร์เมทรินผสมกับ PBO ที่ความเข้มข้น LD25) ยังทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมเชิงบวกอีกด้วย ปริมาณที่ใช้ในการทดลองทางชีวภาพเหล่านี้แสดงเป็นนาโนกรัมของตัวอย่างทดสอบต่อมิลลิกรัมของน้ำหนักตัวตัวเมียที่มีชีวิต การประเมินเชิงทดลองสี่ครั้งสำหรับยุงแต่ละสายพันธุ์ดำเนินการกับยุงที่เลี้ยงแยกกันเป็นกลุ่ม และรวบรวมข้อมูลอัตราการตายและวิเคราะห์โดยใช้ Probit เพื่อกำหนดปริมาณที่ทำให้ถึงแก่ชีวิตใน 24 ชั่วโมง
อัตราการเสียชีวิตได้รับการปรับโดยใช้สูตรของ Abbott [43] ข้อมูลที่ปรับแล้วได้รับการวิเคราะห์โดยการวิเคราะห์การถดถอยแบบ Probit โดยใช้โปรแกรมสถิติคอมพิวเตอร์ SPSS (เวอร์ชัน 19.0) ค่าความเป็นอันตรายที่ 25%, 50%, 90%, 95% และ 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 และ LD99 ตามลำดับ) ได้รับการคำนวณโดยใช้ช่วงความเชื่อมั่น 95% ที่สอดคล้องกัน (95% CI) การวัดความสำคัญและความแตกต่างระหว่างตัวอย่างทดสอบได้รับการประเมินโดยใช้การทดสอบไคสแควร์หรือการทดสอบ Mann-Whitney U ภายในการทดสอบทางชีววิทยาแต่ละครั้ง ผลลัพธ์ได้รับการพิจารณาว่ามีความสำคัญทางสถิติที่ P< 0.05 ค่าสัมประสิทธิ์ความต้านทาน (RR) จะถูกประมาณที่ระดับ LD50 โดยใช้สูตรต่อไปนี้ [12]:
RR > 1 หมายถึงความต้านทาน และ RR ≤ 1 หมายถึงความไว ค่าอัตราส่วนซินเนอร์จี (SR) ของผู้สมัครซินเนอร์จีแต่ละตัวคำนวณได้ดังนี้ [34, 35, 44]:
ปัจจัยนี้แบ่งผลลัพธ์ออกเป็นสามประเภท: ค่า SR ที่ 1±0.05 ถือว่าไม่มีผลชัดเจน ค่า SR ที่ >1.05 ถือว่ามีผลเสริมฤทธิ์กัน และค่า SR ของน้ำมันเหลวสีเหลืองอ่อน A สามารถได้จากการกลั่นด้วยไอน้ำของเหง้าของ C. rotundus และ A. galanga และเปลือกของ C. verum ผลผลิตที่คำนวณจากน้ำหนักแห้งคือ 0.15%, 0.27% (w/w) และ 0.54% (v/v) w) ตามลำดับ (ตารางที่ 1) การศึกษาองค์ประกอบทางเคมีของน้ำมันของ C. rotundus, A. galanga และ C. verum โดย GC-MS พบว่ามีสารประกอบ 19, 17 และ 21 ชนิด ซึ่งคิดเป็น 80.22, 86.75 และ 97.24% ของส่วนประกอบทั้งหมดตามลำดับ (ตารางที่ 2) สารประกอบของน้ำมันเหง้าของ C. lucidum ประกอบด้วยไซเปอโรนีนเป็นหลัก (14.04%) รองลงมาคือคาร์ราลีน (9.57%) อัลฟา-แคปเซลแลน (7.97%) และอัลฟา-แคปเซลแลน (7.53%) ส่วนประกอบทางเคมีหลักของน้ำมันเหง้าข่าคือ β-bisabolene (18.27%) รองลงมาคือ α-bergamotene (16.28%) 1,8-cineole (10.17%) และไพเพอโรนอล (10.09%) ในขณะที่ซินนามัลดีไฮด์ (64.66%) ได้รับการระบุว่าเป็นส่วนประกอบหลักของน้ำมันเปลือกของ C. verum ซินนามิกอะซิเตท (6.61%) อัลฟา-โคเพน (5.83%) และ 3-ฟีนิลโพรพิโอนัลดีไฮด์ (4.09%) ถือเป็นส่วนประกอบรอง โครงสร้างทางเคมีของไซเปอร์น β-บิซาโบลีน และซินนามัลดีไฮด์เป็นสารประกอบหลักของ C. rotundus, A. galanga และ C. verum ตามลำดับ ดังที่แสดงในรูปที่ 2
ผลการทดลองจาก OOs 3 ตัวที่ประเมินกิจกรรมของยุงลาย Aedes ในผู้ใหญ่ ยุงลาย Aedes aegypti แสดงอยู่ในตารางที่ 3 พบว่า EO ทั้งหมดมีผลร้ายแรงต่อยุงลาย Aedes MCM-S ในชนิดและขนาดยาที่แตกต่างกัน Aedes aegypti EO ที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดคือ C. verum รองลงมาคือ A. galanga และ C. rotundus โดยมีค่า LD50 ที่ 3.30, 7.97 และ 10.05 μg/mg MCM-S ในตัวเมียตามลำดับ สูงกว่า 3.22 เล็กน้อย (U = 1 ), Z = -0.775, P = 0.667), 7.94 (U = 2, Z = 0, P = 1) และ 9.57 (U = 0, Z = -1.549, P = 0.333) μg/mg PMD -R ในตัวเมีย ซึ่งสอดคล้องกับการที่ PBO มีผลต่อ PMD-R ในผู้ใหญ่สูงกว่าสายพันธุ์ MSM-S เล็กน้อย โดยมีค่า LD50 ที่ 4.79 และ 6.30 μg/mg ตัวเมีย ตามลำดับ (U = 0, Z = -2.021, P = 0.057 ) สามารถคำนวณได้ว่าค่า LD50 ของ C. verum, A. galanga, C. rotundus และ PBO ต่อ PMD-R ต่ำกว่าค่า MCM-S ประมาณ 0.98, 0.99, 0.95 และ 0.76 เท่าตามลำดับ ดังนั้น นี่จึงบ่งชี้ว่าความอ่อนไหวต่อ PBO และ EO นั้นค่อนข้างใกล้เคียงกันระหว่างสายพันธุ์ Aedes ทั้งสอง แม้ว่า PMD-R จะอ่อนไหวมากกว่า MCM-S แต่ความไวของ Aedes aegypti นั้นไม่สำคัญ ในทางตรงกันข้าม สายพันธุ์ Aedes ทั้งสองสายพันธุ์มีความแตกต่างกันอย่างมากในความไวต่อ permethrin. aegypti (ตารางที่ 4) PMD-R แสดงให้เห็นถึงความต้านทานต่อเพอร์เมทรินอย่างมีนัยสำคัญ (ค่า LD50 = 0.44 ng/mg ในผู้หญิง) โดยมีค่า LD50 สูงกว่าที่ 3.70 เมื่อเทียบกับ MCM-S (ค่า LD50 = 0.44 ng/mg ในผู้หญิง) ng/mg ในผู้หญิง (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) แม้ว่า PMD-R จะมีความไวต่อเพอร์เมทรินน้อยกว่า MCM-S มาก แต่ความไวต่อ PBO และน้ำมัน C. verum, A. galanga และ C. rotundus นั้นสูงกว่า MCM-S เล็กน้อย
จากการทดลองทางชีวภาพของประชากรผู้ใหญ่โดยใช้ EO-permethrin พบว่าส่วนผสมสองชนิดของ permethrin และ EO (LD25) แสดงให้เห็นถึงการทำงานร่วมกัน (ค่า SR > 1.05) หรือไม่มีผลเลย (ค่า SR = 1 ± 0.05) ผลกระทบที่ซับซ้อนของส่วนผสม EO-permethrin ต่อยุงเผือกทดลองในผู้ใหญ่ ยุงลายสายพันธุ์ Aedes aegypti MCM-S และ PMD-R แสดงอยู่ในตารางที่ 4 และรูปที่ 3 พบว่าการเติมน้ำมัน C. verum ช่วยลด LD50 ของ permethrin ต่อ MCM-S ได้เล็กน้อย และเพิ่ม LD50 ต่อ PMD-R ได้เล็กน้อยเป็น 0.44–0.42 ng/mg ในผู้หญิง และจาก 3.70 เป็น 3.85 ng/mg ในผู้หญิง ตามลำดับ ในทางตรงกันข้ามการเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga ทำให้ค่า LD50 ของ permethrin บน MCM-S ลดลงอย่างมีนัยสำคัญจาก 0.44 เป็น 0.07 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) และเหลือ 0.11 (U = 0 ). , Z) = -2.309, P = 0.029) ng/mg ของผู้หญิง จากค่า LD50 ของ MCM-S ค่า SR ของส่วนผสม EO-permethrin หลังจากเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga คือ 6.28 และ 4.00 ตามลำดับ ดังนั้น LD50 ของเพอร์เมทรินต่อ PMD-R จึงลดลงอย่างมีนัยสำคัญจาก 3.70 เป็น 0.42 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) และลดลงเป็น 0.003 เมื่อเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga (U = 0 ). , Z = -2.337, P = 0.029) ng/mg ของตัวเมีย ค่า SR ของเพอร์เมทรินร่วมกับ C. rotundus ต่อ PMD-R อยู่ที่ 8.81 ในขณะที่ค่า SR ของส่วนผสมของ galangal-permethrin อยู่ที่ 1233.33 เมื่อเทียบกับ MCM-S ค่า LD50 ของ PBO ที่เป็นตัวควบคุมเชิงบวกลดลงจาก 0.44 เป็น 0.26 ng/mg (ตัวเมีย) และจาก 3.70 ng/mg (ตัวเมีย) เป็น 0.65 ng/mg (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) และ PMD-R (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) ค่า SR ของส่วนผสม PBO-permethrin สำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R คือ 1.69 และ 5.69 ตามลำดับ ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga และ PBO เพิ่มความเป็นพิษของ permethrin ได้มากกว่าน้ำมัน C. verum สำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R
กิจกรรมของผู้ใหญ่ (LD50) ของ EO, PBO, เพอร์เมทริน (PE) และการรวมกันของสารเหล่านี้ต่อสายพันธุ์ของยุงลายที่ไวต่อไพรีทรอยด์ (MCM-S) และดื้อยา (PMD-R)
[45] สารไพรีทรอยด์สังเคราะห์ใช้ทั่วโลกเพื่อควบคุมสัตว์ขาปล้องเกือบทั้งหมดที่มีความสำคัญทางการเกษตรและทางการแพทย์ อย่างไรก็ตาม เนื่องจากผลที่เป็นอันตรายจากการใช้ยาฆ่าแมลงสังเคราะห์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในแง่ของการพัฒนาและการต้านทานยุงอย่างแพร่หลาย รวมถึงผลกระทบต่อสุขภาพและสิ่งแวดล้อมในระยะยาว จึงมีความจำเป็นอย่างเร่งด่วนในปัจจุบันที่จะต้องลดการใช้ยาฆ่าแมลงสังเคราะห์แบบดั้งเดิมและพัฒนาวิธีอื่น [35, 46, 47] นอกจากการปกป้องสิ่งแวดล้อมและสุขภาพของมนุษย์แล้ว ข้อดีของยาฆ่าแมลงจากพืช ได้แก่ การคัดเลือกสูง มีจำหน่ายทั่วโลก และผลิตและใช้งานได้ง่าย ทำให้ยาเหล่านี้น่าสนใจสำหรับการควบคุมยุงมากขึ้น [32,48, 49] การศึกษาครั้งนี้ นอกจากจะอธิบายลักษณะทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยที่มีประสิทธิภาพผ่านการวิเคราะห์ GC-MS แล้ว ยังประเมินศักยภาพของน้ำมันหอมระเหยจากผู้ใหญ่และความสามารถในการเพิ่มความเป็นพิษของ permethrin. aegypti สังเคราะห์ในสายพันธุ์ที่ไวต่อไพรีทรอยด์ (MCM-S) และสายพันธุ์ที่ต้านทาน (PMD-R) อีกด้วย
การจำแนกลักษณะของ GC-MS แสดงให้เห็นว่าไซเพิร์น (14.04%) β-bisabolene (18.27%) และซินนามัลดีไฮด์ (64.66%) เป็นองค์ประกอบหลักของน้ำมัน C. rotundus, A. galanga และ C. verum ตามลำดับ สารเคมีเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงกิจกรรมทางชีวภาพที่หลากหลาย Ahn et al. [50] รายงานว่า 6-acetoxycyperene ที่แยกได้จากเหง้าของ C. rotundus ทำหน้าที่เป็นสารต่อต้านเนื้องอกและสามารถเหนี่ยวนำให้เกิดอะพอพโทซิสที่ขึ้นอยู่กับคาสเปสในเซลล์มะเร็งรังไข่ β-Bisabolene ที่สกัดจากน้ำมันหอมระเหยของต้นมดยอบแสดงความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งเต้านมของมนุษย์และหนูทั้งในหลอดทดลองและในร่างกาย [51] รายงานว่าซินนามัลดีไฮด์ที่ได้จากสารสกัดจากธรรมชาติหรือสังเคราะห์ในห้องปฏิบัติการมีฤทธิ์ฆ่าแมลง ต้านแบคทีเรีย ต้านเชื้อรา ต้านการอักเสบ ปรับภูมิคุ้มกัน ต้านมะเร็ง และต้านการสร้างเส้นเลือดใหม่ [52]
ผลการทดลองทางชีวภาพของกิจกรรมของผู้ใหญ่ที่ขึ้นอยู่กับปริมาณยาแสดงให้เห็นศักยภาพที่ดีของ EO ที่ทดสอบและแสดงให้เห็นว่ายุงลายสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R มีความอ่อนไหวต่อ EO และ PBO คล้ายคลึงกัน การเปรียบเทียบประสิทธิภาพของ EO และเพอร์เมทรินแสดงให้เห็นว่าตัวหลังมีผลในการก่อภูมิแพ้ที่รุนแรงกว่า โดยค่า LD50 อยู่ที่ 0.44 และ 3.70 ng/mg ในตัวเมียสำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R ตามลำดับ ผลการวิจัยเหล่านี้ได้รับการสนับสนุนจากการศึกษามากมายที่แสดงให้เห็นว่ายาฆ่าแมลงที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติ โดยเฉพาะผลิตภัณฑ์จากพืช โดยทั่วไปจะมีประสิทธิภาพน้อยกว่าสารสังเคราะห์ [31, 34, 35, 53, 54] ซึ่งอาจเป็นเพราะตัวแรกเป็นส่วนผสมที่ซับซ้อนของส่วนประกอบที่มีฤทธิ์หรือไม่มีฤทธิ์ ในขณะที่ตัวหลังเป็นสารประกอบออกฤทธิ์เดี่ยวที่ผ่านการทำให้บริสุทธิ์ อย่างไรก็ตามความหลากหลายและความซับซ้อนของสารออกฤทธิ์จากธรรมชาติที่มีกลไกการออกฤทธิ์ต่างกันอาจช่วยเพิ่มกิจกรรมทางชีวภาพหรือขัดขวางการพัฒนาของความต้านทานในประชากรโฮสต์ [55, 56, 57] นักวิจัยหลายคนได้รายงานถึงศักยภาพในการป้องกันยุงของ C. verum, A. galanga และ C. rotundus และส่วนประกอบต่างๆ เช่น β-bisabolene, cinnamaldehyde และ 1,8-cineole [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63 ,64] อย่างไรก็ตาม การทบทวนวรรณกรรมเผยให้เห็นว่าไม่มีรายงานก่อนหน้านี้เกี่ยวกับผลการทำงานร่วมกันกับเพอร์เมทรินหรือยาฆ่าแมลงสังเคราะห์อื่นๆ ต่อยุงลาย Aedes aegypti.
ในการศึกษานี้พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในความไวต่อเพอร์เมทรินระหว่างสายพันธุ์ Aedes สองสายพันธุ์ Aedes aegypti MCM-S มีความไวต่อเพอร์เมทริน ในขณะที่ PMD-R มีความไวต่อเพอร์เมทรินน้อยกว่ามาก โดยมีอัตราการดื้อยาที่ 8.41 เมื่อเปรียบเทียบกับความไวของ MCM-S แล้ว PMD-R มีความไวต่อเพอร์เมทรินน้อยกว่าแต่มีความไวต่อ EO มากกว่า ซึ่งเป็นพื้นฐานสำหรับการศึกษาเพิ่มเติมที่มุ่งเป้าไปที่การเพิ่มประสิทธิภาพของเพอร์เมทรินโดยการผสมผสานกับ EO การทดสอบทางชีวภาพแบบผสมผสานที่เสริมฤทธิ์กันสำหรับผลกระทบในผู้ใหญ่แสดงให้เห็นว่าส่วนผสมแบบไบนารีของ EO และเพอร์เมทรินลดหรือเพิ่มอัตราการตายของ Aedes aegypti ที่โตเต็มวัย การเติมน้ำมัน C. verum ทำให้ LD50 ของเพอร์เมทรินเมื่อเทียบกับ MCM-S ลดลงเล็กน้อย แต่ LD50 เมื่อเทียบกับ PMD-R เพิ่มขึ้นเล็กน้อย โดยมีค่า SR ที่ 1.05 และ 0.96 ตามลำดับ สิ่งนี้บ่งชี้ว่าน้ำมัน C. verum ไม่มีผลเสริมฤทธิ์หรือต่อต้าน permethrin เมื่อทดสอบกับ MCM-S และ PMD-R ในทางตรงกันข้าม น้ำมัน C. rotundus และ A. galanga แสดงผลเสริมฤทธิ์อย่างมีนัยสำคัญโดยลดค่า LD50 ของ permethrin บน MCM-S หรือ PMD-R อย่างมีนัยสำคัญ เมื่อ permethrin ผสมกับ EO ของ C. rotundus และ A. galanga ค่า SR ของส่วนผสม EO-permethrin สำหรับ MCM-S คือ 6.28 และ 4.00 ตามลำดับ นอกจากนี้ เมื่อประเมิน permethrin เทียบกับ PMD-R ร่วมกับ C. rotundus (SR = 8.81) หรือ A. galanga (SR = 1233.33) ค่า SR เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ เป็นที่น่าสังเกตว่าทั้ง C. rotundus และ A. galanga เพิ่มความเป็นพิษของ permethrin ต่อ PMD-R Ae. aegypti อย่างมีนัยสำคัญ ในทำนองเดียวกัน พบว่า PBO เพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทริน โดยมีค่า SR ที่ 1.69 และ 5.69 สำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R ตามลำดับ เนื่องจาก C. rotundus และ A. galanga มีค่า SR สูงที่สุด จึงถือเป็นสารเสริมฤทธิ์ที่ดีที่สุดในการเพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินในสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R ตามลำดับ
การศึกษาก่อนหน้านี้หลายฉบับได้รายงานผลการทำงานร่วมกันของการใช้ยาฆ่าแมลงสังเคราะห์ร่วมกับสารสกัดจากพืชต่อยุงหลายสายพันธุ์ การทดสอบทางชีวภาพเพื่อฆ่าลูกน้ำยุง Anopheles Stephensi ที่ศึกษาโดย Kalayanasundaram และ Das [65] แสดงให้เห็นว่าเฟนไทออน ซึ่งเป็นออร์กาโนฟอสเฟตสเปกตรัมกว้าง เกี่ยวข้องกับ Cleodendron inerme, Pedalium murax และ Parthenium hysterophorus พบว่าสารสกัดทั้งสองชนิดมีการทำงานร่วมกันอย่างมีนัยสำคัญ โดยมีผลการทำงานร่วมกัน (SF) ที่ 1.31, 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 และ 2.23 ตามลำดับ ในการคัดกรองเพื่อฆ่าลูกน้ำของป่าชายเลน 15 สายพันธุ์ พบว่าสารสกัดปิโตรเลียมอีเธอร์จากรากไม้ค้ำของป่าชายเลนมีประสิทธิภาพสูงสุดต่อ Culex quinquefasciatus โดยมีค่า LC50 เท่ากับ 25.7 มก./ล. [66] รายงานยังระบุว่าสารสกัดนี้มีผลเสริมฤทธิ์กันและไพรีทรัมซึ่งเป็นยาฆ่าแมลงจากพืชสามารถลด LC50 ของไพรีทรัมต่อตัวอ่อนของ C. quinquefasciatus จาก 0.132 มก./ล. เหลือ 0.107 มก./ล. นอกจากนี้ การศึกษาครั้งนี้ยังใช้การคำนวณ SF ที่ 1.23 34,35,44] ได้มีการประเมินประสิทธิภาพร่วมกันของสารสกัดรากมะยมและยาฆ่าแมลงสังเคราะห์หลายชนิด (เช่น เฟนไทออน ไซเปอร์เมทริน (ไพรีทรอยด์สังเคราะห์) และไทม์ฟอส (ยาฆ่าลูกน้ำออร์กาโนฟอสฟอรัส)) ต่อยุงก้นปล่อง Stephensi [54] และ C. quinquefasciatus [34] การใช้ไซเปอร์เมทรินร่วมกับสารสกัดปิโตรเลียมอีเธอร์จากผลเหลืองแสดงให้เห็นผลเสริมฤทธิ์กันต่อไซเปอร์เมทรินในทุกอัตราส่วน อัตราส่วนที่มีประสิทธิภาพสูงสุดคือส่วนผสมไบนารี 1:1 โดยมีค่า LC50 และ SF ที่ 0.0054 ppm และ 6.83 ตามลำดับ เมื่อเทียบกับ An. Stephen West[54] ในขณะที่ส่วนผสมไบนารี 1:1 ของ S. xanthocarpum และ temephos เป็นปฏิปักษ์ (SF = 0.6406) ส่วนผสมของ S. xanthocarpum-fenthion (1:1) แสดงกิจกรรมร่วมกันต่อต้าน C. quinquefasciatus ด้วย SF ที่ 1.3125 [ 34]] Tong และ Blomquist [35] ศึกษาผลกระทบของเอทิลีนออกไซด์จากพืชต่อพิษของคาร์บาริล (คาร์บาเมตสเปกตรัมกว้าง) และเพอร์เมทรินต่อยุงลาย Aedes aegypti. ผลการทดลองพบว่าเอทิลีนออกไซด์จากวุ้น พริกไทยดำ จูนิเปอร์ ฮีลิคริซัม ไม้จันทน์ และงา ทำให้พิษของคาร์บาริลต่อยุงลายเพิ่มขึ้น ค่า SR ของตัวอ่อน Aedes aegypti อยู่ระหว่าง 1.0 ถึง 7.0 ในทางตรงกันข้าม EO ไม่มีพิษต่อยุงลายตัวเต็มวัย ในระยะนี้ยังไม่มีรายงานผลเสริมฤทธิ์กันของการใช้ Aedes aegypti ร่วมกับ EO-carbaryl PBO ถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวกเพื่อเพิ่มพิษของคาร์บาริลต่อยุงลาย ค่า SR ของตัวอ่อน Aedes aegypti และตัวเต็มวัยคือ 4.9-9.5 และ 2.3 ตามลำดับ มีเพียงส่วนผสมไบนารีของเพอร์เมทรินและ EO หรือ PBO เท่านั้นที่ได้รับการทดสอบฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำ ส่วนผสม EO-เพอร์เมทรินมีผลต่อต้าน ในขณะที่ส่วนผสม PBO-เพอร์เมทรินมีผลเสริมฤทธิ์กันต่อยุงลาย ตัวอ่อนของยุงลาย Aedes aegypti อย่างไรก็ตาม การทดลองตอบสนองต่อปริมาณยาและการประเมิน SR สำหรับส่วนผสม PBO-permethrin ยังไม่ได้ดำเนินการ แม้ว่าจะมีผลลัพธ์เพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับผลการทำงานร่วมกันของการผสมผสานการสังเคราะห์ด้วยพืชกับยุงพาหะ แต่ข้อมูลเหล่านี้สนับสนุนผลลัพธ์ที่มีอยู่ ซึ่งเปิดโอกาสให้เพิ่มสารเสริมฤทธิ์ไม่เพียงเพื่อลดปริมาณยาที่ใช้เท่านั้น แต่ยังเพิ่มประสิทธิภาพในการฆ่าอีกด้วย ประสิทธิภาพของแมลง นอกจากนี้ ผลการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกว่าน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga ทำงานร่วมกันอย่างมีประสิทธิภาพสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญต่อสายพันธุ์ของยุงลาย Aedes ที่ไวต่อไพรีทรอยด์และดื้อต่อไพรีทรอยด์เมื่อเปรียบเทียบกับ PBO เมื่อรวมกับพิษของเพอร์เมทริน Aedes aegypti อย่างไรก็ตาม ผลลัพธ์ที่ไม่คาดคิดจากการวิเคราะห์การทำงานร่วมกันแสดงให้เห็นว่าน้ำมัน C. verum มีฤทธิ์ต่อต้านยุงตัวเต็มวัยได้ดีที่สุดต่อสายพันธุ์ของยุงลาย Aedes ทั้งสองสายพันธุ์ ที่น่าประหลาดใจคือ ผลกระทบจากพิษของเพอร์เมทรินต่อยุงลาย Aedes aegypti นั้นไม่น่าพอใจ ผลกระทบจากพิษและผลเสริมฤทธิ์กันที่แตกต่างกันอาจเกิดจากการสัมผัสกับสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในน้ำมันเหล่านี้หลายประเภทและหลายระดับ
แม้จะมีความพยายามที่จะทำความเข้าใจถึงวิธีการปรับปรุงประสิทธิภาพ แต่กลไกการทำงานร่วมกันยังคงไม่ชัดเจน เหตุผลที่เป็นไปได้สำหรับประสิทธิภาพและศักยภาพการทำงานร่วมกันที่แตกต่างกันอาจรวมถึงความแตกต่างในองค์ประกอบทางเคมีของผลิตภัณฑ์ที่ทดสอบและความแตกต่างในความอ่อนไหวต่อยุงที่เกี่ยวข้องกับสถานะและการพัฒนาของการต้านทาน มีความแตกต่างระหว่างส่วนประกอบเอทิลีนออกไซด์หลักและรองที่ทดสอบในการศึกษานี้ และสารประกอบเหล่านี้บางส่วนได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีผลขับไล่และเป็นพิษต่อแมลงศัตรูพืชและพาหะของโรคต่างๆ [61,62,64,67,68] อย่างไรก็ตาม สารประกอบหลักที่แสดงลักษณะเฉพาะในน้ำมัน C. rotundus, A. galanga และ C. verum เช่น ไซเพิร์น β-bisabolene และ cinnamaldehyde ไม่ได้รับการทดสอบในบทความนี้สำหรับกิจกรรมต่อต้านผู้ใหญ่และการทำงานร่วมกันกับ Ae ตามลำดับ Aedes aegypti ดังนั้นจำเป็นต้องมีการศึกษาวิจัยในอนาคตเพื่อแยกส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ที่มีอยู่ในน้ำมันหอมระเหยแต่ละชนิดและอธิบายประสิทธิภาพในการฆ่าแมลงและปฏิสัมพันธ์แบบเสริมฤทธิ์กันต่อยุงพาหะชนิดนี้ โดยทั่วไป กิจกรรมการฆ่าแมลงขึ้นอยู่กับการกระทำและปฏิกิริยาระหว่างพิษกับเนื้อเยื่อแมลง ซึ่งสามารถสรุปได้เป็น 3 ขั้นตอน คือ การแทรกซึมเข้าไปในผิวหนังของแมลงและเยื่อหุ้มอวัยวะเป้าหมาย การกระตุ้น (= การโต้ตอบกับเป้าหมาย) และการล้างพิษ สารพิษ [57, 69] ดังนั้น การเสริมฤทธิ์กันของยาฆ่าแมลงที่ส่งผลให้การรวมกันของสารพิษมีประสิทธิภาพมากขึ้นนั้นต้องมีอย่างน้อยหนึ่งในหมวดหมู่เหล่านี้ เช่น การแทรกซึมที่เพิ่มขึ้น การกระตุ้นสารประกอบที่สะสมมากขึ้น หรือการล้างพิษส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ของยาฆ่าแมลงที่ลดลง ตัวอย่างเช่น ความทนทานต่อพลังงานทำให้การแทรกซึมของหนังกำพร้าช้าลงผ่านหนังกำพร้าที่หนาขึ้นและการต้านทานทางชีวเคมี เช่น การเผาผลาญยาฆ่าแมลงที่เพิ่มขึ้นซึ่งสังเกตได้ในแมลงที่ต้านทานบางสายพันธุ์ [70, 71] ประสิทธิภาพที่สำคัญของ EO ในการเพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทริน โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อ PMD-R อาจบ่งชี้ถึงวิธีแก้ปัญหาของการดื้อยาฆ่าแมลงโดยโต้ตอบกับกลไกการดื้อยา [57, 69, 70, 71] Tong และ Blomquist [35] สนับสนุนผลการศึกษานี้โดยแสดงปฏิสัมพันธ์แบบเสริมฤทธิ์กันระหว่าง EO และยาฆ่าแมลงสังเคราะห์ มีหลักฐานของกิจกรรมยับยั้งเอนไซม์กำจัดพิษ รวมถึงไซโตโครม P450 โมโนออกซิเจเนสและคาร์บอกซิลเอสเทอเรส ซึ่งเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการพัฒนาความต้านทานต่อยาฆ่าแมลงแบบดั้งเดิม PBO ไม่เพียงแต่ถูกกล่าวว่าเป็นสารยับยั้งการเผาผลาญของไซโตโครม P450 โมโนออกซิเจเนส แต่ยังปรับปรุงการแทรกซึมของยาฆ่าแมลงด้วย ซึ่งแสดงให้เห็นจากการใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวกในการศึกษาแบบเสริมฤทธิ์กัน [35, 72] ที่น่าสนใจคือ 1,8-cineole ซึ่งเป็นส่วนประกอบสำคัญอย่างหนึ่งที่พบในน้ำมันข่า เป็นที่ทราบกันดีว่ามีผลเป็นพิษต่อแมลง [22, 63, 73] และมีรายงานว่ามีผลเสริมฤทธิ์กันในงานวิจัยเกี่ยวกับกิจกรรมทางชีวภาพหลายด้าน [74] . ,75,76,77] นอกจากนี้ 1,8-cineole เมื่อใช้ร่วมกับยาต่างๆ เช่น เคอร์คูมิน [78], 5-ฟลูออโรยูราซิล [79], กรดเมเฟนามิก [80] และซิโดวูดิน [81] ยังมีฤทธิ์ส่งเสริมการซึมผ่านอีกด้วย ในหลอดทดลอง ดังนั้น บทบาทที่เป็นไปได้ของ 1,8-cineole ในฤทธิ์เสริมฤทธิ์กันของยาฆ่าแมลงจึงไม่ใช่แค่เป็นส่วนประกอบออกฤทธิ์เท่านั้น แต่ยังเป็นสารเพิ่มการซึมผ่านอีกด้วย เนื่องจากเพอร์เมทรินมีฤทธิ์เสริมฤทธิ์กันมากขึ้น โดยเฉพาะกับ PMD-R ผลเสริมฤทธิ์กันของน้ำมันข่าและน้ำมันไตรโคแซนทีสที่สังเกตพบในการศึกษานี้อาจเกิดจากการโต้ตอบกับกลไกการต้านทาน เช่น ความสามารถในการซึมผ่านของคลอรีนที่เพิ่มขึ้น ไพรีทรอยด์จะเพิ่มการทำงานของสารประกอบที่สะสมและยับยั้งเอนไซม์ที่ทำลายพิษ เช่น ไซโตโครม P450 โมโนออกซิเจเนสและคาร์บอกซิลเอสเทอเรส อย่างไรก็ตาม จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมในแง่มุมเหล่านี้เพื่ออธิบายบทบาทเฉพาะของ EO และสารประกอบแยกตัว (เพียงอย่างเดียวหรือร่วมกัน) ในกลไกเสริมฤทธิ์กัน
ในปี 1977 มีรายงานว่าระดับความต้านทานต่อเพอร์เมทรินเพิ่มขึ้นในประชากรพาหะหลักในประเทศไทย และในช่วงหลายทศวรรษต่อมา การใช้เพอร์เมทรินถูกแทนที่ด้วยสารเคมีไพรีทรอยด์ชนิดอื่นเป็นส่วนใหญ่ โดยเฉพาะสารเคมีที่ถูกแทนที่ด้วยเดลตาเมทริน [82] อย่างไรก็ตาม ความต้านทานต่อเดลตาเมทรินและยาฆ่าแมลงประเภทอื่นของพาหะพบได้ทั่วไปทั่วประเทศเนื่องจากมีการใช้เกินขนาดและต่อเนื่อง [14, 17, 83, 84, 85, 86] เพื่อแก้ไขปัญหานี้ ขอแนะนำให้หมุนเวียนหรือใช้ซ้ำสารกำจัดศัตรูพืชที่ทิ้งแล้วซึ่งมีประสิทธิภาพและเป็นพิษต่อสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมน้อยกว่า เช่น เพอร์เมทริน ปัจจุบัน แม้ว่าการใช้เพอร์เมทรินจะลดลงในโครงการควบคุมยุงของรัฐบาลกลางเมื่อไม่นานนี้ แต่ประชากรยุงยังคงพบความต้านทานต่อเพอร์เมทริน ซึ่งอาจเกิดจากการที่ยุงสัมผัสกับผลิตภัณฑ์ควบคุมศัตรูพืชในครัวเรือนเชิงพาณิชย์ ซึ่งส่วนใหญ่ประกอบด้วยเพอร์เมทรินและไพรีทรอยด์ชนิดอื่น [14, 17] ดังนั้นการนำเพอร์เมทรินกลับมาใช้ใหม่ให้ประสบความสำเร็จนั้นต้องอาศัยการพัฒนาและการนำกลยุทธ์ต่างๆ มาปฏิบัติเพื่อลดการต้านทานแมลง แม้ว่าน้ำมันหอมระเหยที่ทดสอบแยกกันในงานวิจัยนี้จะไม่มีประสิทธิผลเท่ากับเพอร์เมทริน แต่การทำงานร่วมกับเพอร์เมทรินก็ส่งผลให้เกิดผลเสริมฤทธิ์ที่น่าประทับใจ ซึ่งเป็นข้อบ่งชี้ที่มีแนวโน้มดีว่าปฏิกิริยาระหว่าง EO กับกลไกการต้านทานทำให้การใช้เพอร์เมทรินร่วมกับ EO มีประสิทธิภาพมากกว่ายาฆ่าแมลงหรือ EO เพียงอย่างเดียว โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อ PMD-R Ae. Aedes aegypti ประโยชน์ของส่วนผสมเสริมฤทธิ์ในการเพิ่มประสิทธิภาพแม้จะใช้ปริมาณที่น้อยกว่าเพื่อควบคุมแมลง ก็อาจนำไปสู่การจัดการการต้านทานที่ดีขึ้นและลดต้นทุนได้ [33, 87] จากผลลัพธ์เหล่านี้ เป็นเรื่องน่ายินดีที่ EO จาก A. galanga และ C. rotundus มีประสิทธิภาพมากกว่า PBO อย่างมีนัยสำคัญในการเสริมฤทธิ์ความเป็นพิษของเพอร์เมทรินในสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R และเป็นทางเลือกที่มีศักยภาพสำหรับสารช่วยเออร์โกเจนิกแบบดั้งเดิม
สาร EO ที่เลือกใช้มีผลเสริมฤทธิ์กันอย่างมีนัยสำคัญในการเพิ่มความเป็นพิษต่อ PMD-R ในผู้ใหญ่ Ae. aegypti โดยเฉพาะน้ำมันข่า มีค่า SR สูงถึง 1233.33 ซึ่งบ่งชี้ว่าสาร EO มีแนวโน้มที่ดีในวงกว้างในการเพิ่มประสิทธิภาพของเพอร์เมทริน ซึ่งอาจกระตุ้นให้เกิดการใช้ผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติที่มีฤทธิ์ใหม่ ซึ่งเมื่อใช้รวมกันแล้วอาจเพิ่มการใช้ผลิตภัณฑ์ควบคุมยุงที่มีประสิทธิภาพสูงได้ นอกจากนี้ ยังเผยให้เห็นถึงศักยภาพของเอทิลีนออกไซด์ในฐานะสารเสริมฤทธิ์ทางเลือกเพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของยาฆ่าแมลงแบบเก่าหรือแบบดั้งเดิมเพื่อแก้ไขปัญหาการดื้อยาที่มีอยู่ในประชากรยุง การใช้พืชที่หาได้ง่ายในโปรแกรมควบคุมยุงไม่เพียงช่วยลดการพึ่งพาวัสดุที่นำเข้าและมีราคาแพงเท่านั้น แต่ยังกระตุ้นความพยายามในท้องถิ่นในการเสริมสร้างระบบสาธารณสุขอีกด้วย
ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงผลการทำงานร่วมกันอย่างมีนัยสำคัญที่เกิดจากการใช้เอทิลีนออกไซด์ร่วมกับเพอร์เมทริน ผลลัพธ์เน้นย้ำถึงศักยภาพของเอทิลีนออกไซด์ในฐานะสารเสริมฤทธิ์ของพืชในการควบคุมยุง โดยเพิ่มประสิทธิภาพของเพอร์เมทรินในการควบคุมยุง โดยเฉพาะในกลุ่มยุงที่ดื้อยา การพัฒนาและการวิจัยในอนาคตจะต้องมีการวิเคราะห์ทางชีวภาพแบบเสริมฤทธิ์ของน้ำมันข่าและอัลพิเนียและสารประกอบที่แยกจากกัน การรวมกันของยาฆ่าแมลงที่มีแหล่งกำเนิดตามธรรมชาติหรือสังเคราะห์กับยุงหลายสายพันธุ์และระยะต่างๆ และการทดสอบความเป็นพิษกับสิ่งมีชีวิตที่ไม่ใช่เป้าหมาย การใช้เอทิลีนออกไซด์เป็นทางเลือกเสริมฤทธิ์ที่เป็นไปได้ในทางปฏิบัติ
องค์การอนามัยโลก กลยุทธ์ระดับโลกเพื่อการป้องกันและควบคุมไข้เลือดออก 2012–2020 เจนีวา: องค์การอนามัยโลก 2012
ผู้ประกอบ SC, Costa F. , Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G. , และคณะ ไวรัสซิกา: ประวัติศาสตร์ การเกิดขึ้น ชีววิทยา และโอกาสในการควบคุม การวิจัยต้านไวรัส 2016;130:69–80.
องค์การอนามัยโลก. เอกสารข้อเท็จจริงเกี่ยวกับโรคไข้เลือดออก. 2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/. เข้าถึงเมื่อ: 20 มกราคม 2017
กรมสาธารณสุข. สถานการณ์ปัจจุบันของโรคไข้เลือดออกและโรคไข้เลือดออกในประเทศไทย. 2559. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf. เข้าถึงเมื่อ: 6 มกราคม 2560
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ. การป้องกันไข้เลือดออกและการควบคุมพาหะนำโรคในสิงคโปร์มาเป็นเวลา 35 ปี โรคติดเชื้อเฉียบพลัน 2006;12:887–93
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. ระบุความท้าทายและเสนอแนวทางแก้ไขเพื่อควบคุมเวกเตอร์ไวรัส Aedes aegypti PLOS Medicine 2008;5:362–6
ศูนย์ควบคุมและป้องกันโรคไข้เลือดออก กีฏวิทยา และนิเวศวิทยา 2559 http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/ เข้าถึงเมื่อ: 6 มกราคม 2560
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE การเปรียบเทียบกิจกรรมการฆ่าลูกน้ำของใบ เปลือก ลำต้น และรากของ Jatropa curcas (Euphorbiaceae) กับ Anopheles gambiae ซึ่งเป็นพาหะของมาเลเรีย SZhBR. 2014;3:29-32
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. ลักษณะที่อยู่อาศัยของตัวอ่อนยุงก้นปล่องในพื้นที่กำจัดมาเลเรียของโครงการกำจัดมาเลเรียในอิหร่านตะวันออกเฉียงใต้ Asia Pacific J Trop Biomed. 2014;4(Suppl 1):S73–80
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. การทบทวนแนวทางการควบคุมเวกเตอร์ การป้องกันและควบคุมการระบาดของไวรัสเวสต์ไนล์ และความท้าทายที่ยุโรปต้องเผชิญ พาหะของปรสิต 2014;7:323
Muthusamy R., Shivakumar MS การคัดเลือกและกลไกระดับโมเลกุลของความต้านทานไซเปอร์เมทรินในหนอนผีเสื้อสีแดง (Amsacta albistriga Walker) สรีรวิทยาชีวเคมีของศัตรูพืช 2014;117:54–61
Ramkumar G., Shivakumar MS การศึกษาในห้องปฏิบัติการเกี่ยวกับความต้านทานต่อเพอร์เมทรินและการต้านทานข้ามสายพันธุ์ของ Culex quinquefasciatus กับยาฆ่าแมลงชนิดอื่น Palastor Research Center. 2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD. เคมีของยาฆ่าแมลง: สวัสดิการของมนุษย์และสิ่งแวดล้อม เล่มที่ 3: กลไกการออกฤทธิ์ การเผาผลาญ และพิษวิทยา นิวยอร์ก: สำนักพิมพ์ Pergamon, 1983
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. การทบทวนความต้านทานต่อยาฆ่าแมลงและการหลีกเลี่ยงพฤติกรรมของพาหะนำโรคในมนุษย์ในประเทศไทย. ปรสิตพาหะ. 2556;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. รูปแบบปัจจุบันของการดื้อยาฆ่าแมลงในหมู่ยุงพาหะในประเทศไทย Southeast Asia J Trop Med Public Health. 1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. สถานภาพของโรคมาเลเรียในประเทศไทย Southeast Asia J Trop Med Public Health. 2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. ความถี่ชั่วคราวของการกลายพันธุ์ที่ต้านทานการน็อคดาวน์ F1534C และ V1016G ในยุงลาย Aedes aegypti ในเชียงใหม่ ประเทศไทย และผลกระทบของการกลายพันธุ์ต่อประสิทธิภาพของการพ่นหมอกความร้อนที่มีสารไพรีทรอยด์ Aktatrop. 2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. การดื้อยาฆ่าแมลงในพาหะไข้เลือดออกหลัก Aedes albopictus และ Aedes aegypti สรีรวิทยาทางชีวเคมีของศัตรูพืช 2012;104:126–31.
เวลาโพสต์ : 08-07-2024