ผลเสริมฤทธิ์กันของน้ำมันหอมระเหยต่อผู้ใหญ่เพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินต่อยุงลาย (Diptera: Culicidae) |

ในโครงการก่อนหน้านี้ที่ทดสอบโรงงานแปรรูปอาหารในท้องถิ่นสำหรับยุงในประเทศไทย พบว่าน้ำมันหอมระเหย (EOs) ของ Cyperus rotundus ข่า และอบเชย มีฤทธิ์ต้านยุงได้ดีกับยุงลายในความพยายามที่จะลดการใช้แบบเดิมๆยาฆ่าแมลงและปรับปรุงการควบคุมประชากรยุงที่ดื้อยา การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อระบุการทำงานร่วมกันที่อาจเกิดขึ้นระหว่างผลการฆ่าผู้ใหญ่ของเอทิลีนออกไซด์และความเป็นพิษของเพอร์เมทรินต่อยุงลายaegypti รวมถึงสายพันธุ์ที่ต้านทานต่อไพรีทรอยด์และไวต่อสารไพรีทรอยด์
เพื่อประเมินองค์ประกอบทางเคมีและกิจกรรมการฆ่าของ EO ที่สกัดจากเหง้าของ C. rotundus และ A. galanga และเปลือกของ C. verum เทียบกับสายพันธุ์ที่ไวต่อยาเมืองเชียงใหม่ (MCM-S) และสายพันธุ์ต้านทาน ปางไม้แดง (PMD-R) ).) Ae ที่ใช้งานสำหรับผู้ใหญ่ยุงลาย.นอกจากนี้ ยังได้ดำเนินการตรวจวิเคราะห์ทางชีวภาพสำหรับผู้ใหญ่ของส่วนผสม EO-เพอร์เมทรินกับยุงลายเหล่านี้เพื่อทำความเข้าใจกิจกรรมเสริมฤทธิ์กันของยุงลายสายพันธุ์อะอียิปต์
การศึกษาคุณลักษณะทางเคมีโดยใช้วิธีวิเคราะห์ GC-MS พบว่ามีการระบุสารประกอบ 48 ชนิดจาก EO ของ C. rotundus, A. galanga และ C. verum คิดเป็นร้อยละ 80.22%, 86.75% และ 97.24% ขององค์ประกอบทั้งหมดตามลำดับCyperene (14.04%), β-bisabolene (18.27%) และ cinnamaldehyde (64.66%) เป็นส่วนประกอบหลักของน้ำมันไซเพอรัส น้ำมันข่า และน้ำมันบัลซามิก ตามลำดับในการทดสอบการฆ่าผู้ใหญ่ทางชีววิทยา C. rotundus, A. galanga และ C. verum EVs มีประสิทธิผลในการฆ่า Aeค่า aegypti, MCM-S และ PMD-R LD50 เท่ากับ 10.05 และ 9.57 μg/mg ตัวเมีย 7.97 และ 7.94 μg/mg ตัวเมีย และ 3.30 และ 3.22 μg/mg ตัวเมีย ตามลำดับประสิทธิภาพของ MCM-S และ PMD-R Ae ในการฆ่าผู้ใหญ่aegypti ใน EO เหล่านี้อยู่ใกล้กับไพเพอร์นิล บิวทอกไซด์ (ค่า PBO, LD50 = 6.30 และ 4.79 ไมโครกรัม/มก. เพศหญิง ตามลำดับ) แต่ไม่ออกเสียงเท่ากับเพอร์เมทริน (ค่า LD50 = 0.44 และ 3.70 ng/มก. เพศหญิง ตามลำดับ)อย่างไรก็ตาม การวิเคราะห์ทางชีวภาพแบบผสมผสานพบการทำงานร่วมกันระหว่าง EO และเพอร์เมทรินการทำงานร่วมกันอย่างมีนัยสำคัญกับเพอร์เมทรินในการกำจัดยุงลาย Aedes สองสายพันธุ์ยุงลายพบได้ใน EM ของ C. rotundus และ A. galangaการเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga ช่วยลดค่า LD50 ของเพอร์เมทรินบน MCM-S จาก 0.44 เป็น 0.07 ng/mg และ 0.11 ng/mg ในเพศหญิง ตามลำดับ โดยมีค่าอัตราส่วนการทำงานร่วมกัน (SR) ​​6.28 และ 4.00 ตามลำดับนอกจากนี้ C. rotundus และ A. galanga EOs ยังลดค่า LD50 ของเพอร์เมทรินบน PMD-R จาก 3.70 เป็น 0.42 ng/mg และ 0.003 ng/mg ในเพศหญิง ตามลำดับ โดยมีค่า SR เท่ากับ 8.81 และ 1233.33 ตามลำดับ-
ผลเสริมฤทธิ์กันของการผสม EO-permethrin เพื่อเพิ่มความเป็นพิษของผู้ใหญ่ต่อยุงลาย 2 สายพันธุ์ยุงลายแสดงให้เห็นถึงบทบาทที่น่าหวังสำหรับเอทิลีนออกไซด์ในฐานะตัวเสริมฤทธิ์ในการเพิ่มประสิทธิภาพการป้องกันยุง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่สารประกอบแบบดั้งเดิมไม่ได้ผลหรือไม่เหมาะสม
ยุงลาย (Diptera: Culicidae) เป็นพาหะหลักของโรคไข้เลือดออกและโรคไวรัสติดเชื้ออื่นๆ เช่น ไข้เหลือง ชิคุนกุนยา และไวรัสซิกา ซึ่งก่อให้เกิดภัยคุกคามร้ายแรงต่อมนุษย์อย่างต่อเนื่อง[1, 2]-ไวรัสไข้เลือดออกเป็นไข้เลือดออกที่ทำให้เกิดโรคที่ร้ายแรงที่สุดที่ส่งผลกระทบต่อมนุษย์ โดยมีผู้ป่วยประมาณ 5-100 ล้านรายเกิดขึ้นทุกปี และมากกว่า 2.5 พันล้านคนทั่วโลกตกอยู่ในความเสี่ยง [3]การระบาดของโรคติดเชื้อนี้สร้างภาระมหาศาลให้กับประชากร ระบบสุขภาพ และเศรษฐกิจของประเทศเขตร้อนส่วนใหญ่ [1]จากข้อมูลของกระทรวงสาธารณสุข ในปี 2558 มีรายงานผู้ป่วยไข้เลือดออก 142,925 ราย และมีผู้เสียชีวิต 141 รายทั่วประเทศ มากกว่าจำนวนผู้ป่วยและเสียชีวิตในปี 2557 ถึง 3 เท่า [4]แม้จะมีหลักฐานทางประวัติศาสตร์ แต่ไข้เลือดออกก็ถูกกำจัดหรือลดลงอย่างมากโดยยุงลายหลังจากควบคุมยุงลายได้ [5] อัตราการติดเชื้อเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วและโรคนี้แพร่กระจายไปทั่วโลก ส่วนหนึ่งเนื่องมาจากภาวะโลกร้อนที่เกิดขึ้นมานานหลายทศวรรษการกำจัดและการควบคุมเอยุงลายค่อนข้างยากเพราะเป็นพาหะของยุงในบ้านที่ผสมพันธุ์ หาอาหาร วางไข่ และวางไข่ในและรอบ ๆ ที่อยู่อาศัยของมนุษย์ในระหว่างวันนอกจากนี้ ยุงชนิดนี้ยังมีความสามารถในการปรับตัวต่อการเปลี่ยนแปลงสิ่งแวดล้อมหรือการรบกวนที่เกิดจากเหตุการณ์ทางธรรมชาติ (เช่น ความแห้งแล้ง) หรือมาตรการควบคุมของมนุษย์ และสามารถกลับคืนสู่จำนวนเดิมได้ [6, 7]เนื่องจากวัคซีนป้องกันไข้เลือดออกเพิ่งได้รับการอนุมัติเมื่อไม่นานมานี้ และไม่มีการรักษาเฉพาะสำหรับโรคไข้เลือดออก การป้องกันและลดความเสี่ยงของการแพร่เชื้อไข้เลือดออกจึงขึ้นอยู่กับการควบคุมพาหะของยุงและกำจัดการติดต่อของมนุษย์กับพาหะ
โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การใช้สารเคมีในการควบคุมยุงมีบทบาทสำคัญในด้านสาธารณสุขในฐานะองค์ประกอบสำคัญของการจัดการพาหะนำโรคแบบบูรณาการอย่างครอบคลุมวิธีการทางเคมีที่ได้รับความนิยมมากที่สุด ได้แก่ การใช้ยาฆ่าแมลงที่มีพิษต่ำซึ่งออกฤทธิ์กับลูกน้ำยุง (ยาฆ่าแมลง) และยุงตัวเต็มวัย (adidocides)การควบคุมตัวอ่อนด้วยการลดแหล่งที่มาและการใช้สารเคมีฆ่าลูกน้ำเป็นประจำ เช่น ออร์กาโนฟอสเฟต และสารควบคุมการเจริญเติบโตของแมลง ถือว่ามีความสำคัญอย่างไรก็ตาม ผลกระทบด้านสิ่งแวดล้อมที่ไม่พึงประสงค์ที่เกี่ยวข้องกับสารกำจัดศัตรูพืชสังเคราะห์และการบำรุงรักษาที่ซับซ้อนและต้องใช้แรงงานเข้มข้นยังคงเป็นข้อกังวลหลัก [8, 9]การควบคุมพาหะนำโรคแบบดั้งเดิม เช่น การควบคุมโดยผู้ใหญ่ ยังคงเป็นวิธีการควบคุมที่มีประสิทธิผลสูงสุดในระหว่างการระบาดของไวรัส เนื่องจากสามารถกำจัดพาหะนำโรคได้อย่างรวดเร็วและในวงกว้าง รวมทั้งลดอายุขัยและอายุยืนของประชากรพาหะในท้องถิ่น [3], 10].สารเคมีฆ่าแมลงสี่ประเภท: ออร์กาโนคลอรีน (เรียกว่าดีดีทีเท่านั้น) ออร์กาโนฟอสเฟต คาร์บาเมต และไพรีทรอยด์เป็นพื้นฐานของโปรแกรมควบคุมแมลง โดยไพรีทรอยด์ถือเป็นประเภทที่ประสบความสำเร็จมากที่สุดพวกมันมีประสิทธิภาพสูงในการต่อสู้กับสัตว์ขาปล้องหลายชนิดและมีประสิทธิภาพต่ำความเป็นพิษต่อสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมปัจจุบัน สารไพรีทรอยด์สังเคราะห์เป็นยาฆ่าแมลงเชิงพาณิชย์ส่วนใหญ่ ซึ่งคิดเป็นประมาณ 25% ของตลาดยาฆ่าแมลงทั่วโลก [11, 12]Permethrin และ deltamethrin เป็นยาฆ่าแมลงชนิดไพรีทรอยด์ในวงกว้างที่ใช้ทั่วโลกมานานหลายทศวรรษเพื่อควบคุมศัตรูพืชหลายชนิดที่มีความสำคัญทางการเกษตรและการแพทย์ [13, 14]ในช่วงทศวรรษปี 1950 ดีดีทีได้รับเลือกให้เป็นสารเคมีทางเลือกสำหรับโครงการควบคุมยุงด้านสาธารณสุขแห่งชาติของประเทศไทยภายหลังการใช้ดีดีทีอย่างแพร่หลายในพื้นที่ที่มีโรคมาลาเรียระบาด ประเทศไทยจึงค่อยๆ เลิกใช้ดีดีทีระหว่างปี พ.ศ. 2538 ถึง พ.ศ. 2543 และแทนที่ด้วยไพรีทรอยด์ 2 ชนิด ได้แก่ เพอร์เมทรินและเดลทาเมทริน [15, 16]ยาฆ่าแมลงชนิดไพรีทรอยด์เหล่านี้ถูกนำมาใช้ในช่วงต้นทศวรรษ 1990 เพื่อควบคุมโรคมาลาเรียและไข้เลือดออก โดยหลักๆ ผ่านทางการบำบัดด้วยมุ้งและการใช้หมอกความร้อนและสเปรย์ความเป็นพิษต่ำเป็นพิเศษ [14, 17]อย่างไรก็ตาม ผลิตภัณฑ์เหล่านี้สูญเสียประสิทธิภาพเนื่องจากการต้านทานยุงที่รุนแรง และการขาดการปฏิบัติตามข้อกำหนดของสาธารณะเนื่องจากความกังวลเกี่ยวกับสุขภาพของประชาชนและผลกระทบต่อสิ่งแวดล้อมของสารเคมีสังเคราะห์สิ่งนี้ก่อให้เกิดความท้าทายที่สำคัญต่อความสำเร็จของโปรแกรมควบคุมพาหะของภัยคุกคาม [14, 18, 19]เพื่อให้กลยุทธ์มีประสิทธิผล ทันเวลา และเหมาะสมมากขึ้น จำเป็นต้องมีมาตรการรับมือขั้นตอนการจัดการที่แนะนำ ได้แก่ การทดแทนสารธรรมชาติ การหมุนเวียนสารเคมีประเภทต่างๆ การเติมสารเสริมฤทธิ์กัน และการผสมสารเคมีหรือการใช้สารเคมีประเภทต่างๆ พร้อมกัน [14, 20, 21]ดังนั้นจึงมีความจำเป็นเร่งด่วนในการค้นหาและพัฒนาทางเลือกและผู้ทำงานร่วมกันที่เป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อม สะดวก และมีประสิทธิภาพ และการศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตอบสนองความต้องการนี้
ยาฆ่าแมลงที่ได้จากธรรมชาติ โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่มีส่วนประกอบจากพืช ได้แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการประเมินทางเลือกในการควบคุมยุงทั้งในปัจจุบันและอนาคต [22, 23, 24]การศึกษาหลายชิ้นแสดงให้เห็นว่าสามารถควบคุมพาหะยุงที่สำคัญได้โดยใช้ผลิตภัณฑ์จากพืช โดยเฉพาะน้ำมันหอมระเหย (EO) เป็นตัวฆ่าผู้ใหญ่คุณสมบัติในการฆ่ายุงลายที่สำคัญบางชนิดพบได้ในน้ำมันพืชหลายชนิด เช่น คื่นฉ่าย ยี่หร่า ซีโดอาเรีย โป๊ยกั๊ก พริกไทย ไปป์ ไธม์ Schinus terebinthifolia Cymbopogon citratus Cymbopogon schoenanthus Cymbopogon giganteus Chenopodium ambrosioides Cochlospermum planchonii ยูคาลิปตัส ter eticornis ., ยูคาลิปตัส citriodora, Cananga odorata และ Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].ปัจจุบันเอทิลีนออกไซด์ไม่เพียงแต่ใช้เดี่ยวๆ เท่านั้น แต่ยังใช้ร่วมกับสารจากพืชที่สกัดได้หรือยาฆ่าแมลงสังเคราะห์ที่มีอยู่ ซึ่งทำให้เกิดความเป็นพิษในระดับต่างๆ กันการรวมกันของยาฆ่าแมลงแบบดั้งเดิม เช่น ออร์กาโนฟอสเฟต คาร์บาเมต และไพรีทรอยด์ ร่วมกับเอทิลีนออกไซด์/สารสกัดจากพืชออกฤทธิ์เสริมฤทธิ์กันหรือเป็นปฏิปักษ์ต่อพิษของพวกมัน และแสดงให้เห็นว่ามีประสิทธิผลต่อโรคพาหะและแมลงศัตรูพืช [31,32,33,34,35]อย่างไรก็ตาม การศึกษาส่วนใหญ่เกี่ยวกับผลกระทบที่เป็นพิษจากการเสริมฤทธิ์กันของการผสมสารพฤกษเคมีที่มีหรือไม่มีสารเคมีสังเคราะห์นั้นได้ดำเนินการกับแมลงพาหะและแมลงศัตรูพืชในการเกษตรมากกว่าในยุงที่มีความสำคัญทางการแพทย์นอกจากนี้ งานส่วนใหญ่เกี่ยวกับผลเสริมฤทธิ์กันของการผสมยาฆ่าแมลงที่สังเคราะห์จากพืชกับพาหะนำยุงได้มุ่งเน้นไปที่ผลของตัวอ่อน
ในการศึกษาก่อนหน้านี้ที่ดำเนินการโดยผู้เขียนซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของโครงการวิจัยที่กำลังดำเนินการคัดกรองสารฆ่าแมลงจากพืชอาหารพื้นเมืองในประเทศไทย พบว่าเอทิลีนออกไซด์จาก Cyperus rotundus ข่า และอบเชย มีฤทธิ์ต้านยุงลายที่โตเต็มวัยอียิปต์ [36].ดังนั้น การศึกษานี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินประสิทธิผลของ EO ที่แยกได้จากพืชสมุนไพรเหล่านี้ต่อยุงลายaegypti รวมถึงสายพันธุ์ที่ต้านทานต่อไพรีทรอยด์และไวต่อสารไพรีทรอยด์ผลเสริมฤทธิ์กันของการผสมไบนารีของเอทิลีนออกไซด์และไพรีทรอยด์สังเคราะห์ที่มีประสิทธิภาพดีในผู้ใหญ่ได้รับการวิเคราะห์เช่นกัน เพื่อลดการใช้ยาฆ่าแมลงแบบดั้งเดิม และเพิ่มความต้านทานต่อยุงพาหะ โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อยุงลายยุงลาย.บทความนี้รายงานลักษณะทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยที่มีประสิทธิภาพและศักยภาพในการเพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินสังเคราะห์ต่อยุงลายaegypti ในสายพันธุ์ที่ไวต่อไพรีทรอยด์ (MCM-S) และสายพันธุ์ต้านทาน (PMD-R)
เหง้าของ C. rotundus และ A. galanga และเปลือกของ C. verum (รูปที่ 1) ที่ใช้ในการสกัดน้ำมันหอมระเหยซื้อจากผู้จำหน่ายยาสมุนไพรในจังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทยการจำแนกพืชเหล่านี้ทำได้โดยการปรึกษาหารือกับนายเจมส์ แฟรงคลิน แม็กซ์เวลล์ นักพฤกษศาสตร์สมุนไพร ภาควิชาชีววิทยา วิทยาลัยวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยเชียงใหม่ (มช.) จังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย และนักวิทยาศาสตร์ วรรณริ เจริญทรัพย์ในภาควิชาเภสัชศาสตร์ วิทยาลัยเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยคาร์เนกีเมลลอน ตัวอย่าง Ms. Voucher ของพืชแต่ละชนิดจะถูกจัดเก็บไว้ในภาควิชาปรสิตวิทยาที่คณะแพทยศาสตร์มหาวิทยาลัยคาร์เนกีเมลลอนเพื่อใช้ในอนาคต
ตัวอย่างพืชจะถูกตากให้แห้งแยกกันเป็นเวลา 3-5 วันในพื้นที่เปิดโล่งที่มีการระบายอากาศและอุณหภูมิโดยรอบประมาณ 30 ± 5 °C เพื่อขจัดความชื้นก่อนการสกัดน้ำมันหอมระเหยธรรมชาติ (EO)วัสดุจากพืชแห้งแต่ละชนิดรวมทั้งหมด 250 กรัมถูกบดด้วยกลไกให้เป็นผงหยาบ และใช้ในการแยกน้ำมันหอมระเหย (EO) โดยการกลั่นด้วยไอน้ำเครื่องกลั่นประกอบด้วยแผ่นทำความร้อนไฟฟ้า ขวดก้นกลมขนาด 3000 มล. คอลัมน์สกัด คอนเดนเซอร์ และอุปกรณ์ Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., โตเกียว ประเทศญี่ปุ่น) .เติมน้ำกลั่น 1,600 มล. และเม็ดแก้ว 10-15 เม็ดลงในขวด จากนั้นให้ตั้งอุณหภูมิไว้ที่ประมาณ 100°C โดยใช้เครื่องทำความร้อนไฟฟ้าเป็นเวลาอย่างน้อย 3 ชั่วโมงจนกว่าการกลั่นจะเสร็จสิ้นและไม่มีการผลิต EO อีกต่อไปชั้น EO ถูกแยกออกจากเฟสที่เป็นน้ำโดยใช้กรวยแยก ทำให้แห้งบนแอนไฮดรัส โซเดียม ซัลเฟต (Na2SO4) และเก็บไว้ในขวดสีน้ำตาลปิดผนึกที่ 4°C จนกระทั่งองค์ประกอบทางเคมีและกิจกรรมของผู้ใหญ่ถูกตรวจสอบ
องค์ประกอบทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยดำเนินการพร้อมกันกับการทดสอบทางชีวภาพสำหรับสารสำหรับผู้ใหญ่การวิเคราะห์เชิงคุณภาพดำเนินการโดยใช้ระบบ GC-MS ซึ่งประกอบด้วยแก๊สโครมาโตกราฟีของ Hewlett-Packard (Wilmington, CA, USA) 7890A ที่ติดตั้งเครื่องตรวจจับแบบเลือกมวลสี่เท่าตัวเดียว (Agilent Technologies, Wilmington, CA, USA) และ MSD 5975C (EI ).(เทคโนโลยีเอจิเลนต์).
คอลัมน์โครมาโตกราฟี – DB-5MS (30 ม. × ID 0.25 มม. × ความหนาของฟิล์ม 0.25 µm)เวลารัน GC-MS ทั้งหมดคือ 20 นาทีเงื่อนไขการวิเคราะห์คืออุณหภูมิของหัวฉีดและสายส่งคือ 250 และ 280 °C ตามลำดับอุณหภูมิเตาตั้งให้เพิ่มจาก 50°C เป็น 250°C ในอัตรา 10°C/นาที ก๊าซตัวพาคือฮีเลียมอัตราการไหล 1.0 มล./นาที;ปริมาตรการฉีดคือ 0.2 ไมโครลิตร (1/10% โดยปริมาตรใน CH2Cl2, อัตราส่วนการแยก 100:1);ระบบอิเล็กตรอนไอออไนเซชันที่มีพลังงานไอออไนเซชัน 70 eV ใช้สำหรับการตรวจจับ GC-MSช่วงการรับข้อมูลคือ 50–550 หน่วยมวลอะตอม (amu) และความเร็วในการสแกนอยู่ที่ 2.91 การสแกนต่อวินาทีเปอร์เซ็นต์สัมพัทธ์ของส่วนประกอบจะแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ที่ทำให้เป็นมาตรฐานโดยพื้นที่พีคการระบุส่วนผสม EO ขึ้นอยู่กับดัชนีการเก็บรักษา (RI)RI คำนวณโดยใช้สมการของ Van den Dool และ Kratz [37] สำหรับอนุกรม n-alkanes (C8-C40) และเปรียบเทียบกับดัชนีการเก็บรักษาจากวรรณกรรม [38] และฐานข้อมูลห้องสมุด (NIST 2008 และ Wiley 8NO8)ลักษณะเฉพาะของสารประกอบที่แสดง เช่น โครงสร้างและสูตรโมเลกุล ได้รับการยืนยันโดยการเปรียบเทียบกับตัวอย่างที่แท้จริงที่มีอยู่
มาตรฐานการวิเคราะห์สำหรับเพอร์เมทรินสังเคราะห์และปิเปอโรนิลบิวทอไซด์ (PBO, การควบคุมเชิงบวกในการศึกษาการทำงานร่วมกัน) ซื้อจาก Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์, มิสซูรี่, สหรัฐอเมริกา)ชุดทดสอบสำหรับผู้ใหญ่ขององค์การอนามัยโลก (WHO) และปริมาณการวินิจฉัยของกระดาษที่ชุบเพอร์เมทริน (0.75%) ซื้อในเชิงพาณิชย์จากศูนย์ควบคุมเวกเตอร์ของ WHO ในปีนัง ประเทศมาเลเซียสารเคมีและรีเอเจนต์อื่นๆ ทั้งหมดที่ใช้เป็นเกรดวิเคราะห์และซื้อจากสถาบันท้องถิ่นในจังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย
ยุงที่ใช้เป็นสิ่งมีชีวิตทดสอบในการทดสอบทางชีวภาพสำหรับผู้ใหญ่นั้นเป็นยุงลายในห้องปฏิบัติการผสมพันธุ์อย่างอิสระaegypti รวมถึงสายพันธุ์เมืองเชียงใหม่ที่อ่อนแอ (MCM-S) และสายพันธุ์ปางไม้แดงที่ต้านทาน (PMD-R)สายพันธุ์ MCM-S ได้มาจากตัวอย่างในท้องถิ่นที่เก็บในพื้นที่เมืองเชียงใหม่ จังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย และได้รับการบำรุงรักษาในห้องกีฏวิทยา ภาควิชาปรสิตวิทยา คณะแพทยศาสตร์ มช. ตั้งแต่ปี พ.ศ. 2538 [39]PMD-R สายพันธุ์ ซึ่งพบว่าต้านทานต่อเพอร์เมทริน ได้แยกได้จากยุงสนามที่เก็บมาจากบ้านปางไม้แดง อำเภอแม่แตง จังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย และได้รับการบำรุงรักษาที่สถาบันเดียวกันตั้งแต่ปี พ.ศ. 2540 [40 ]สายพันธุ์ PMD-R ถูกปลูกภายใต้แรงกดดันแบบเลือกสรรเพื่อรักษาระดับความต้านทานโดยการสัมผัสเพอร์เมทริน 0.75% เป็นระยะๆ โดยใช้ชุดตรวจจับของ WHO พร้อมการดัดแปลงบางอย่าง [41]แต่ละสายพันธุ์ของเอ๋ยุงลายถูกตั้งอาณานิคมแยกกันในห้องปฏิบัติการปลอดเชื้อโรคที่อุณหภูมิ 25 ± 2 °C และความชื้นสัมพัทธ์ 80 ± 10% และช่วงแสง/มืด 14:10 ชั่วโมงตัวอ่อนประมาณ 200 ตัวถูกเก็บไว้ในถาดพลาสติก (ยาว 33 ซม. กว้าง 28 ซม. และสูง 9 ซม.) เติมน้ำประปาที่ความหนาแน่น 150–200 ตัวต่อถาด และให้อาหารวันละสองครั้งด้วยบิสกิตสุนัขที่ผ่านการฆ่าเชื้อหนอนตัวเต็มวัยจะถูกเก็บไว้ในกรงชื้นและให้อาหารอย่างต่อเนื่องด้วยสารละลายซูโครสที่เป็นน้ำ 10% และสารละลายน้ำเชื่อมวิตามินรวม 10%ยุงตัวเมียดูดเลือดเพื่อวางไข่เป็นประจำตัวเมียอายุสองถึงห้าวันที่ไม่ได้รับอาหารจากเลือดสามารถนำไปใช้อย่างต่อเนื่องในการตรวจวิเคราะห์ทางชีววิทยาสำหรับผู้ใหญ่
ทำการทดสอบทางชีวภาพในการตอบสนองต่อปริมาณและการตายของ EO กับยุงลายตัวเมียที่โตเต็มวัยaegypti, MCM-S และ PMD-R โดยใช้วิธีการเฉพาะที่ดัดแปลงตามเกณฑ์วิธีมาตรฐานของ WHO สำหรับการทดสอบความไวต่อยา [42]EO จากโรงงานแต่ละแห่งถูกเจือจางตามลำดับด้วยตัวทำละลายที่เหมาะสม (เช่น เอทานอลหรืออะซิโตน) เพื่อให้ได้ความเข้มข้น 4-6 ชุดตามลำดับหลังจากการดมยาสลบด้วยคาร์บอนไดออกไซด์ (CO2) ยุงจะถูกชั่งน้ำหนักทีละตัวจากนั้นยุงที่ถูกดมยาสลบจะถูกเก็บไว้ไม่ให้เคลื่อนไหวบนกระดาษกรองแห้งบนแผ่นเย็นแบบกำหนดเองภายใต้กล้องจุลทรรศน์สเตอริโอเพื่อป้องกันการเปิดใช้งานอีกครั้งในระหว่างขั้นตอนสำหรับการรักษาแต่ละครั้ง สารละลาย EO 0.1 ไมโครลิตรถูกนำไปใช้กับ pronotum ตอนบนของเพศหญิงโดยใช้เครื่องจ่ายไมโครดิสเพนเซอร์แบบใช้มือถือของ Hamilton (ไมโครลิตรซีรี่ส์ 700 ™, บริษัท แฮมิลตัน, รีโน, เนวาดา, สหรัฐอเมริกา)ผู้หญิงจำนวน 25 คนได้รับการรักษาในแต่ละความเข้มข้น โดยมีอัตราการเสียชีวิตตั้งแต่ 10% ถึง 95% สำหรับความเข้มข้นที่แตกต่างกันอย่างน้อย 4 ระดับยุงที่ได้รับการบำบัดด้วยตัวทำละลายทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมเพื่อป้องกันการปนเปื้อนของตัวอย่างทดสอบ ให้เปลี่ยนกระดาษกรองด้วยกระดาษกรองใหม่สำหรับการทดสอบ EO แต่ละรายการปริมาณที่ใช้ในการตรวจวิเคราะห์ทางชีวภาพเหล่านี้จะแสดงเป็นไมโครกรัมของ EO ต่อมิลลิกรัมของน้ำหนักตัวหญิงที่มีชีวิตการออกฤทธิ์ของ PBO สำหรับผู้ใหญ่ยังได้รับการประเมินในลักษณะเดียวกันกับ EO โดยที่ PBO ถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวกในการทดลองเสริมฤทธิ์กันยุงที่ได้รับการรักษาในทุกกลุ่มจะถูกใส่ในถ้วยพลาสติกและให้ซูโครส 10% บวกกับน้ำเชื่อมวิตามินรวม 10%การวิเคราะห์ทางชีวภาพทั้งหมดดำเนินการที่ 25 ± 2 °C และความชื้นสัมพัทธ์ 80 ± 10% และทำซ้ำสี่ครั้งด้วยการควบคุมการตายระหว่างช่วงเลี้ยง 24 ชั่วโมงได้รับการตรวจสอบและยืนยันโดยยุงขาดการตอบสนองต่อการกระตุ้นเชิงกล จากนั้นจึงบันทึกตามค่าเฉลี่ยของการจำลอง 4 ครั้งทำการทดลองซ้ำสี่ครั้งสำหรับแต่ละตัวอย่างทดสอบโดยใช้ยุงกลุ่มต่างๆผลลัพธ์ได้รับการสรุปและใช้ในการคำนวณเปอร์เซ็นต์อัตราการเสียชีวิต ซึ่งใช้ในการกำหนดปริมาณรังสีที่ทำให้เสียชีวิตใน 24 ชั่วโมงโดยการวิเคราะห์แบบโปรบิต
ประเมินผลฤทธิ์ต้านมะเร็งที่เสริมฤทธิ์กันของ EO และเพอร์เมทรินโดยใช้ขั้นตอนการทดสอบความเป็นพิษในท้องถิ่น [42] ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ใช้อะซิโตนหรือเอทานอลเป็นตัวทำละลายในการเตรียมเพอร์เมทรินตามความเข้มข้นที่ต้องการ รวมถึงส่วนผสมไบนารีของ EO และเพอร์เมทริน (EO-เพอร์เมทริน: เพอร์เมทรินผสมกับ EO ที่ความเข้มข้น LD25)ชุดทดสอบ (เพอร์เมทรินและ EO-เพอร์เมทริน) ได้รับการประเมินเทียบกับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R ของ Aeยุงลาย.ยุงตัวเมีย 25 ตัวแต่ละตัวได้รับเพอร์เมทริน 4 โดส เพื่อทดสอบประสิทธิภาพในการฆ่ายุงตัวเต็มวัย โดยแต่ละยุงจะทำซ้ำ 4 ครั้งเพื่อระบุตัวที่ทำงานร่วมกันของ EO ได้ จะมีการจ่าย EO-permethrin 4 ถึง 6 โดสให้กับยุงตัวเมีย 25 ตัวแต่ละตัว โดยแต่ละแอปพลิเคชั่นจะทำซ้ำสี่ครั้งการบำบัดด้วย PBO-เพอร์เมทริน (เพอร์เมทรินที่ผสมกับความเข้มข้น LD25 ของ PBO) ยังทำหน้าที่เป็นกลุ่มควบคุมเชิงบวกอีกด้วยปริมาณที่ใช้ในการตรวจวิเคราะห์ทางชีวภาพเหล่านี้แสดงเป็นนาโนกรัมของตัวอย่างทดสอบต่อมิลลิกรัมของน้ำหนักตัวหญิงที่มีชีวิตการประเมินการทดลองสี่ครั้งสำหรับยุงแต่ละสายพันธุ์ได้ดำเนินการในกลุ่มที่เลี้ยงแยกกัน และข้อมูลการตายถูกรวบรวมและวิเคราะห์โดยใช้ Probit เพื่อกำหนดปริมาณรังสีที่อันตรายถึงชีวิตใน 24 ชั่วโมง
ปรับอัตราการตายโดยใช้สูตรแอ๊บบอต [43]ข้อมูลที่ปรับปรุงแล้ววิเคราะห์โดยการวิเคราะห์การถดถอยแบบ Probit โดยใช้โปรแกรมสถิติคอมพิวเตอร์ SPSS (เวอร์ชัน 19.0)ค่าอันตรายถึงชีวิต 25%, 50%, 90%, 95% และ 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 และ LD99 ตามลำดับ) คำนวณโดยใช้ช่วงความเชื่อมั่น 95% ที่สอดคล้องกัน (95% CI)การวัดความสำคัญและความแตกต่างระหว่างตัวอย่างทดสอบได้รับการประเมินโดยใช้การทดสอบไคสแควร์หรือการทดสอบ Mann-Whitney U ภายในการทดสอบทางชีววิทยาแต่ละครั้งผลลัพธ์ถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติที่ P<0.05.ค่าสัมประสิทธิ์ความต้านทาน (RR) ประมาณที่ระดับ LD50 โดยใช้สูตรต่อไปนี้ [12]:
RR > 1 หมายถึง ความต้านทาน และ RR ≤ 1 หมายถึง ความไวค่าอัตราส่วนการทำงานร่วมกัน (SR) ของผู้สมัครที่ทำงานร่วมกันแต่ละคนได้รับการคำนวณดังนี้ [34, 35, 44]:
ปัจจัยนี้แบ่งผลลัพธ์ออกเป็นสามประเภท: ค่า SR 1±0.05 ถือว่าไม่มีผลกระทบที่ชัดเจน ค่า SR >1.05 ถือว่ามีผลเสริมฤทธิ์กัน และค่า SR ของน้ำมันของเหลวสีเหลืองอ่อนสามารถ ได้จากการกลั่นด้วยไอน้ำของเหง้าของ C. rotundus และ A. galanga และเปลือกของ C. verumอัตราผลตอบแทนที่คำนวณจากน้ำหนักแห้งคือ 0.15%, 0.27% (น้ำหนัก/น้ำหนัก) และ 0.54% (ปริมาตร/ปริมาตร)w) ตามลำดับ (ตารางที่ 1)การศึกษาองค์ประกอบทางเคมีของน้ำมันของ C. rotundus, A. galanga และ C. verum ของ GC-MS พบว่ามีสารประกอบ 19, 17 และ 21 ชนิด คิดเป็นร้อยละ 80.22, 86.75 และ 97.24% ของส่วนประกอบทั้งหมด ตามลำดับ (ตารางที่ 2 ).สารประกอบน้ำมันเหง้า C. lucidum ส่วนใหญ่ประกอบด้วยไซเปอโรนีน (14.04%) ตามด้วยคาร์ราลีน (9.57%) α-capsellan (7.97%) และ α-capsellan (7.53%)ส่วนประกอบทางเคมีหลักของน้ำมันเหง้าข่าคือ β-bisabolene (18.27%) รองลงมาคือ α-bergamotene (16.28%) 1,8-cineole (10.17%) และpiperonol (10.09%)ในขณะที่ซินนามัลดีไฮด์ (64.66%) ถูกระบุว่าเป็นส่วนประกอบหลักของน้ำมันเปลือก C. verum แต่ซินนามิกอะซิเตต (6.61%), α-โคเพน (5.83%) และ 3-ฟีนิลโพรพิโอนัลดีไฮด์ (4.09%) ถือเป็นส่วนผสมรองโครงสร้างทางเคมีของไซเปอร์น β-บิซาโบลีน และซินนามัลดีไฮด์เป็นสารประกอบหลักของ C. rotundus, A. galanga และ C. verum ตามลำดับ ดังแสดงในรูปที่ 2
ผลลัพธ์จาก OO สามแห่งที่ประเมินกิจกรรมสำหรับผู้ใหญ่ต่อยุงลายยุงอะอียิปต์แสดงอยู่ในตารางที่ 3 พบว่า EO ทั้งหมดมีผลร้ายแรงต่อยุงลาย MCM-S ในขนาดและปริมาณที่แตกต่างกันยุงลาย.EO ที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดคือ C. verum รองลงมาคือ A. galanga และ C. rotundus โดยมีค่า LD50 เท่ากับ 3.30, 7.97 และ 10.05 μg/mg MCM-S ตัวเมีย ตามลำดับ สูงกว่า 3.22 เล็กน้อย (U = 1 ), Z = -0.775, P = 0.667), 7.94 (U = 2, Z = 0, P = 1) และ 9.57 (U = 0, Z = -1.549, P = 0.333) μg/mg PMD -R ในสตรีสิ่งนี้สอดคล้องกับ PBO ที่มีผลต่อ PMD-R ในผู้ใหญ่สูงกว่าสายพันธุ์ MSM-S เล็กน้อย โดยมีค่า LD50 เท่ากับ 4.79 และ 6.30 μg/mg ตัวเมีย ตามลำดับ (U = 0, Z = -2.021, P = 0.057 ) .-สามารถคำนวณได้ว่าค่า LD50 ของ C. verum, A. galanga, C. rotundus และ PBO เทียบกับ PMD-R มีค่าต่ำกว่าค่าเทียบกับ MCM-S ประมาณ 0.98, 0.99, 0.95 และ 0.76 เท่า ตามลำดับดังนั้นสิ่งนี้บ่งชี้ว่าความไวต่อ PBO และ EO นั้นค่อนข้างคล้ายคลึงกันระหว่างสายพันธุ์ Aedes สองสายพันธุ์แม้ว่า PMD-R จะอ่อนแอกว่า MCM-S แต่ความไวของยุงลายก็ไม่มีนัยสำคัญในทางตรงกันข้าม ยุงลายทั้งสองสายพันธุ์มีความไวต่อเพอร์เมทรินแตกต่างกันอย่างมากเออียิปต์ตี (ตารางที่ 4)PMD-R แสดงให้เห็นความต้านทานต่อเพอร์เมทรินอย่างมีนัยสำคัญ (ค่า LD50 = 0.44 ng/mg ในผู้หญิง) โดยมีค่า LD50 สูงกว่า 3.70 เมื่อเปรียบเทียบกับ MCM-S (ค่า LD50 = 0.44 ng/mg ในผู้หญิง ) ng/mg ในผู้หญิง (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029)แม้ว่า PMD-R จะมีความไวต่อเพอร์เมทรินน้อยกว่า MCM-S มาก แต่ความไวต่อน้ำมัน PBO และ C. verum, A. galanga และ C. rotundus นั้นสูงกว่า MCM-S เล็กน้อย
ดังที่สังเกตได้ในการวิเคราะห์ทางชีวภาพของประชากรผู้ใหญ่ของการผสม EO-เพอร์เมทริน สารผสมไบนารีของเพอร์เมทรินและ EO (LD25) แสดงการทำงานร่วมกัน (ค่า SR > 1.05) หรือไม่มีผลกระทบ (ค่า SR = 1 ± 0.05)ผลที่ซับซ้อนสำหรับผู้ใหญ่ของส่วนผสม EO-เพอร์เมทรินต่อยุงเผือกทดลองยุงลายสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R แสดงไว้ในตารางที่ 4 และรูปที่ 3 พบว่าการเติมน้ำมัน C. verum ช่วยลด LD50 ของเพอร์เมทรินเล็กน้อยเมื่อเทียบกับ MCM-S และเพิ่ม LD50 เล็กน้อยเมื่อเทียบกับ PMD-R เป็น 0.44– 0 .42 นาโนกรัม/มก. ในผู้หญิง และจาก 3.70 ถึง 3.85 นาโนกรัม/มก. ในผู้หญิง ตามลำดับในทางตรงกันข้าม การเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga ช่วยลด LD50 ของเพอร์เมทรินบน MCM-S จาก 0.44 เป็น 0.07 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) และ 0.11 (U = 0) อย่างมีนัยสำคัญ, Z) = -2.309, P = 0.029) สตรี ng/mgจากค่า LD50 ของ MCM-S ค่า SR ของส่วนผสม EO-permethrin หลังจากเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga เท่ากับ 6.28 และ 4.00 ตามลำดับดังนั้น LD50 ของเพอร์เมทรินเทียบกับ PMD-R ลดลงอย่างมีนัยสำคัญจาก 3.70 เป็น 0.42 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) และเป็น 0.003 ด้วยการเติมน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga (U = 0 ) ., Z = -2.337, P = 0.029) ng/mg ตัวเมียค่า SR ของเพอร์เมทรินรวมกับ C. rotundus เทียบกับ PMD-R เท่ากับ 8.81 ในขณะที่ค่า SR ของส่วนผสมข่า-เพอร์เมทรินคือ 1233.33เมื่อเทียบกับ MCM-S ค่า LD50 ของ PBO กลุ่มควบคุมเชิงบวกลดลงจาก 0.44 เป็น 0.26 ng/mg (ตัวเมีย) และจาก 3.70 ng/mg (ตัวเมีย) เป็น 0.65 ng/mg (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) และ PMD-R (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029)ค่า SR ของส่วนผสม PBO-เพอร์เมทรินสำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R เท่ากับ 1.69 และ 5.69 ตามลำดับผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga และ PBO เพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินในระดับที่สูงกว่าน้ำมัน C. verum สำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R
กิจกรรมสำหรับผู้ใหญ่ (LD50) ของ EO, PBO, เพอร์เมทริน (PE) และการรวมกันกับยุงลายที่ไวต่อไพรีทรอยด์ (MCM-S) และสายพันธุ์ต้านทาน (PMD-R)ยุงลาย
[45].ไพรีทรอยด์สังเคราะห์ถูกนำมาใช้ทั่วโลกเพื่อควบคุมสัตว์ขาปล้องเกือบทั้งหมดที่มีความสำคัญทางการเกษตรและทางการแพทย์อย่างไรก็ตาม เนื่องจากการใช้ยาฆ่าแมลงสังเคราะห์ส่งผลที่เป็นอันตราย โดยเฉพาะอย่างยิ่งในแง่ของการพัฒนาและการต้านทานยุงในวงกว้าง รวมถึงผลกระทบต่อสุขภาพและสิ่งแวดล้อมในระยะยาว ขณะนี้จึงมีความจำเป็นเร่งด่วนในการลดการใช้ ของยาฆ่าแมลงสังเคราะห์แบบดั้งเดิมและพัฒนาทางเลือกอื่น [35, 46, 47]นอกเหนือจากการปกป้องสิ่งแวดล้อมและสุขภาพของมนุษย์แล้ว ข้อดีของยาฆ่าแมลงจากพืชยังรวมถึงการคัดเลือกสูง ความพร้อมใช้ทั่วโลก และความง่ายในการผลิตและการใช้งาน ทำให้น่าสนใจยิ่งขึ้นสำหรับการควบคุมยุง [32,48, 49]การศึกษานี้ นอกเหนือจากการอธิบายคุณลักษณะทางเคมีของน้ำมันหอมระเหยที่มีประสิทธิภาพผ่านการวิเคราะห์ GC-MS แล้ว ยังประเมินประสิทธิภาพของน้ำมันหอมระเหยสำหรับผู้ใหญ่และความสามารถในการเพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินสังเคราะห์อีกด้วยaegypti ในสายพันธุ์ที่ไวต่อไพรีทรอยด์ (MCM-S) และสายพันธุ์ต้านทาน (PMD-R)
การศึกษาลักษณะเฉพาะของ GC-MS แสดงให้เห็นว่า cypern (14.04%), β-bisabolene (18.27%) และ cinnamaldehyde (64.66%) เป็นองค์ประกอบหลักของน้ำมัน C. rotundus, A. galanga และ C. verum ตามลำดับสารเคมีเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงกิจกรรมทางชีวภาพที่หลากหลายอันและคณะ[50] รายงานว่า 6-acetoxycyperene ซึ่งแยกได้จากเหง้าของ C. rotundus ทำหน้าที่เป็นสารประกอบต้านมะเร็งและสามารถกระตุ้นการตายของเซลล์ที่ขึ้นกับแคสเปสในเซลล์มะเร็งรังไข่β-Bisabolene สกัดจากน้ำมันหอมระเหยของต้นมดยอบ แสดงความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งต่อมลูกหมากของมนุษย์และหนูทั้งภายนอกร่างกายและในร่างกาย [51]มีรายงานว่าซินนามัลดีไฮด์ที่ได้จากสารสกัดธรรมชาติหรือสังเคราะห์ในห้องปฏิบัติการมีฤทธิ์ในการฆ่าแมลง ต้านเชื้อแบคทีเรีย เชื้อรา ต้านการอักเสบ ปรับภูมิคุ้มกัน ต้านมะเร็ง และต้านการสร้างหลอดเลือด [52]
ผลลัพธ์ของการทดสอบทางชีวภาพของกิจกรรมสำหรับผู้ใหญ่ที่ขึ้นกับขนาดยาแสดงให้เห็นศักยภาพที่ดีของ EO ที่ทดสอบ และแสดงให้เห็นว่ายุงลายสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R มีความไวต่อ EO และ PBO คล้ายคลึงกันยุงลาย.การเปรียบเทียบประสิทธิผลของ EO และเพอร์เมทรินแสดงให้เห็นว่าอย่างหลังมีฤทธิ์ภูมิแพ้ที่รุนแรงกว่า: ค่า LD50 คือ 0.44 และ 3.70 ng/mg ในเพศหญิงสำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R ตามลำดับการค้นพบนี้ได้รับการสนับสนุนจากการศึกษาจำนวนมากที่แสดงให้เห็นว่ายาฆ่าแมลงที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติ โดยเฉพาะผลิตภัณฑ์จากพืช โดยทั่วไปมีประสิทธิภาพน้อยกว่าสารสังเคราะห์ [31, 34, 35, 53, 54]อาจเป็นเพราะอย่างแรกเป็นส่วนผสมที่ซับซ้อนของส่วนผสมออกฤทธิ์หรือไม่ใช้งาน ในขณะที่อย่างหลังเป็นสารประกอบออกฤทธิ์เดี่ยวที่บริสุทธิ์อย่างไรก็ตาม ความหลากหลายและความซับซ้อนของสารออกฤทธิ์จากธรรมชาติที่มีกลไกการออกฤทธิ์ที่แตกต่างกันอาจเพิ่มฤทธิ์ทางชีวภาพหรือขัดขวางการพัฒนาความต้านทานในประชากรที่เป็นโฮสต์ [55, 56, 57]นักวิจัยหลายคนได้รายงานถึงศักยภาพในการป้องกันยุงของ C. verum, A. galanga และ C. rotundus และส่วนประกอบของพวกมัน เช่น β-bisabolene, cinnamaldehyde และ 1,8-cineole [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63 ,64].อย่างไรก็ตาม การทบทวนวรรณกรรมพบว่า ยังไม่มีรายงานก่อนหน้านี้เกี่ยวกับผลเสริมฤทธิ์ร่วมกับเพอร์เมทรินหรือยาฆ่าแมลงสังเคราะห์อื่นๆ ต่อยุงลายยุงลาย.
ในการศึกษานี้ พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญต่อความไวต่อเพอร์เมทรินระหว่างยุงลายสองสายพันธุ์ยุงลาย.MCM-S มีความไวต่อเพอร์เมทริน ในขณะที่ PMD-R มีความไวต่อเพอร์เมทรินน้อยกว่ามาก โดยมีอัตราการต้านทานอยู่ที่ 8.41เมื่อเปรียบเทียบกับความไวของ MCM-S แล้ว PMD-R มีความไวต่อเพอร์เมทรินน้อยกว่า แต่มีความไวต่อ EO มากกว่า ซึ่งเป็นพื้นฐานสำหรับการศึกษาเพิ่มเติมที่มุ่งเพิ่มประสิทธิภาพของเพอร์เมทรินโดยรวมเข้ากับ EOการทดสอบทางชีวภาพแบบผสมผสานที่ทำงานร่วมกันสำหรับผลในผู้ใหญ่แสดงให้เห็นว่าการผสมแบบไบนารีของ EO และเพอร์เมทรินลดหรือเพิ่มอัตราการเสียชีวิตของยุงลายที่โตเต็มวัยยุงลาย.การเติมน้ำมัน C. verum ทำให้ LD50 ของเพอร์เมทรินลดลงเล็กน้อยเมื่อเทียบกับ MCM-S แต่เพิ่ม LD50 เล็กน้อยเมื่อเทียบกับ PMD-R โดยมีค่า SR เท่ากับ 1.05 และ 0.96 ตามลำดับสิ่งนี้บ่งชี้ว่าน้ำมัน C. verum ไม่มีผลเสริมฤทธิ์กันหรือเป็นปฏิปักษ์ต่อเพอร์เมทริน เมื่อทดสอบกับ MCM-S และ PMD-Rในทางตรงกันข้าม น้ำมัน C. rotundus และ A. galanga แสดงผลเสริมฤทธิ์กันอย่างมีนัยสำคัญโดยการลดค่า LD50 ของเพอร์เมทรินบน MCM-S หรือ PMD-R ลงอย่างมากเมื่อผสมเพอร์เมทรินกับ EO ของ C. rotundus และ A. galanga ค่า SR ของส่วนผสม EO-permethrin สำหรับ MCM-S เท่ากับ 6.28 และ 4.00 ตามลำดับนอกจากนี้ เมื่อประเมินเพอร์เมทรินเทียบกับ PMD-R ร่วมกับ C. rotundus (SR = 8.81) หรือ A. galanga (SR = 1233.33) ค่า SR ก็เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเป็นที่น่าสังเกตว่าทั้ง C. rotundus และ A. galanga เพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินต่อ PMD-R Aeaอียิปต์อย่างมีนัยสำคัญในทำนองเดียวกัน พบว่า PBO เพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินด้วยค่า SR 1.69 และ 5.69 สำหรับสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R ตามลำดับเนื่องจาก C. rotundus และ A. galanga มีค่า SR สูงที่สุด จึงถือเป็นการทำงานร่วมกันที่ดีที่สุดในการเพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทรินบน MCM-S และ PMD-R ตามลำดับ
การศึกษาก่อนหน้านี้หลายชิ้นได้รายงานถึงผลเสริมฤทธิ์กันของการผสมผสานระหว่างยาฆ่าแมลงสังเคราะห์และสารสกัดจากพืชต่อยุงหลายชนิดการตรวจทางชีวภาพของตัวอ่อนแมลงกับยุงก้นปล่อง Stephensi ที่ศึกษาโดย Kalayanasundaram และ Das [65] แสดงให้เห็นว่า fenthion ซึ่งเป็นออร์กาโนฟอสเฟตในวงกว้าง มีความสัมพันธ์กับ Cleodendron inerme, Pedalium murax และ Parthenium hysterophorusการทำงานร่วมกันอย่างมีนัยสำคัญถูกพบระหว่างสารสกัดที่มีผลเสริมฤทธิ์กัน (SF) เท่ากับ 1.31, 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 และ 2.23 ตามลำดับในการคัดกรองตัวอ่อนของป่าชายเลน 15 สายพันธุ์ พบว่าสารสกัดปิโตรเลียมอีเทอร์จากรากที่ปลูกบนป่าชายเลนมีประสิทธิภาพสูงสุดในการต่อต้าน Culex quinquefasciatus โดยมีค่า LC50 25.7 มก./ลิตร [66]นอกจากนี้ ยังมีรายงานผลการทำงานร่วมกันของสารสกัดนี้และไพรีทรัมยาฆ่าแมลงทางพฤกษศาสตร์ในการลด LC50 ของไพรีทรัมต่อตัวอ่อน C. quinquefasciatus จาก 0.132 มก./ลิตร เป็น 0.107 มก./ลิตร นอกจากนี้ ยังใช้การคำนวณ SF ที่ 1.23 ในการศึกษานี้34,35,44].มีการประเมินประสิทธิผลร่วมกันของสารสกัดจากรากมะเขือม่วงและยาฆ่าแมลงสังเคราะห์หลายชนิด (เช่น เฟนไทออน ไซเปอร์เมทริน (ไพรีทรอยด์สังเคราะห์) และไทม์ธฟอส (สารกำจัดตัวอ่อนออร์กาโนฟอสฟอรัส)) ต่อยุงก้นปล่องStephensi [54] และ C. quinquefasciatus [34]การใช้ไซเพอร์เมทรินและสารสกัดปิโตรเลียมอีเทอร์ผลไม้สีเหลืองร่วมกันแสดงให้เห็นผลเสริมฤทธิ์กันกับไซเพอร์เมทรินในทุกอัตราส่วนอัตราส่วนที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดคือชุดค่าผสมไบนารี 1:1 โดยมีค่า LC50 และ SF เท่ากับ 0.0054 ppm และ 6.83 ตามลำดับ เทียบกับ Anสตีเฟน เวสต์[54].ในขณะที่ส่วนผสมไบนารี่ 1:1 ของ S. xanthocarpum และ temephos เป็นปฏิปักษ์ (SF = 0.6406) การผสม S. xanthocarpum-fenthion (1:1) แสดงฤทธิ์เสริมฤทธิ์ต้าน C. quinquefasciatus โดยมี SF เท่ากับ 1.3125 [ 34]]Tong และ Blomquist [35] ศึกษาผลของเอทิลีนออกไซด์จากพืชต่อความเป็นพิษของคาร์บาริล (คาร์บาเมตในวงกว้าง) และเพอร์เมทรินต่อยุงลายยุงลาย.ผลการวิจัยพบว่าเอทิลีนออกไซด์จากวุ้น พริกไทยดำ จูนิเปอร์ เฮลิครีซัม ไม้จันทน์ และงา เพิ่มความเป็นพิษของคาร์บาริลต่อยุงลายค่า SR ตัวอ่อนของ aegypti แตกต่างกันไปตั้งแต่ 1.0 ถึง 7.0ในทางตรงกันข้าม ไม่มี EO ตัวใดที่เป็นพิษต่อยุงลายตัวเต็มวัยในขั้นตอนนี้ ไม่มีรายงานผลการทำงานร่วมกันสำหรับการรวมกันของ Aedes aegypti และ EO-carbarylPBO ถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวกเพื่อเพิ่มความเป็นพิษของคาร์บาริลต่อยุงลายค่า SR ของตัวอ่อนยุงลายและตัวเต็มวัยคือ 4.9-9.5 และ 2.3 ตามลำดับมีการทดสอบเฉพาะส่วนผสมไบนารี่ของเพอร์เมทรินและ EO หรือ PBO เพื่อหาฤทธิ์ในการฆ่าลูกน้ำส่วนผสม EO-เพอร์เมทรินมีฤทธิ์เป็นปฏิปักษ์ ในขณะที่ส่วนผสม PBO-เพอร์เมทรินมีฤทธิ์เสริมฤทธิ์ต้านยุงลายตัวอ่อนของยุงลาย.อย่างไรก็ตาม ยังไม่ได้ดำเนินการทดลองการตอบสนองต่อขนาดยาและการประเมิน SR สำหรับของผสม PBO-เพอร์เมทรินแม้ว่าจะได้รับผลลัพธ์เพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับผลการทำงานร่วมกันของการผสมสารสังเคราะห์แสงกับยุงพาหะ แต่ข้อมูลเหล่านี้สนับสนุนผลลัพธ์ที่มีอยู่ ซึ่งเปิดโอกาสในการเพิ่มสารเสริมฤทธิ์ไม่เพียงแต่เพื่อลดขนาดยาที่ใช้ แต่ยังเพื่อเพิ่มผลการฆ่าด้วยประสิทธิภาพของแมลงนอกจากนี้ ผลการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกว่าน้ำมัน C. rotundus และ A. galanga มีประสิทธิภาพที่สูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญในการต่อต้านยุงลายสายพันธุ์ที่ไวต่อไพรีทรอยด์และต้านทานไพรีทรอยด์ของยุงลาย Aedes เมื่อเปรียบเทียบกับ PBO เมื่อรวมกับความเป็นพิษของเพอร์เมทรินยุงลาย.อย่างไรก็ตาม ผลลัพธ์ที่ไม่คาดคิดจากการวิเคราะห์เสริมฤทธิ์กันแสดงให้เห็นว่าน้ำมัน C. verum มีฤทธิ์ต่อต้านผู้ใหญ่ได้ดีที่สุดต่อยุงลายทั้งสองสายพันธุ์น่าแปลกที่พิษของเพอร์เมทรินต่อยุงลายไม่น่าพอใจการเปลี่ยนแปลงของผลกระทบที่เป็นพิษและผลเสริมฤทธิ์กันอาจเกิดจากการสัมผัสกับส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพประเภทและระดับต่างๆ ในน้ำมันเหล่านี้
แม้จะมีความพยายามที่จะเข้าใจวิธีการปรับปรุงประสิทธิภาพ แต่กลไกการทำงานร่วมกันก็ยังไม่ชัดเจนสาเหตุที่เป็นไปได้สำหรับประสิทธิภาพและศักยภาพในการเสริมฤทธิ์ที่แตกต่างกันอาจรวมถึงความแตกต่างในองค์ประกอบทางเคมีของผลิตภัณฑ์ที่ทดสอบ และความแตกต่างในความไวต่อยุงที่เกี่ยวข้องกับสถานะการดื้อยาและพัฒนาการมีความแตกต่างระหว่างส่วนประกอบเอทิลีนออกไซด์หลักและส่วนประกอบรองที่ทดสอบในการศึกษานี้ และสารประกอบเหล่านี้บางส่วนแสดงให้เห็นว่ามีฤทธิ์ขับไล่และเป็นพิษต่อแมลงศัตรูพืชและพาหะนำโรคหลายชนิด [61,62,64,67,68]อย่างไรก็ตาม สารประกอบหลักที่มีลักษณะเฉพาะในน้ำมัน C. rotundus, A. galanga และ C. verum เช่น cypern, β-bisabolene และ cinnamaldehyde ไม่ได้ถูกทดสอบในบทความนี้สำหรับกิจกรรมต่อต้านผู้ใหญ่และเสริมฤทธิ์ต้าน Ae ตามลำดับยุงลาย.ดังนั้นจึงจำเป็นต้องมีการศึกษาในอนาคตเพื่อแยกส่วนผสมออกฤทธิ์ที่มีอยู่ในน้ำมันหอมระเหยแต่ละชนิด และชี้แจงประสิทธิภาพของยาฆ่าแมลงและปฏิกิริยาเสริมฤทธิ์กันกับพาหะนำยุงชนิดนี้โดยทั่วไป ฤทธิ์ฆ่าแมลงขึ้นอยู่กับการกระทำและปฏิกิริยาระหว่างสารพิษและเนื้อเยื่อของแมลง ซึ่งสามารถอธิบายให้เข้าใจง่ายและแบ่งออกเป็นสามขั้นตอน: การเจาะเข้าไปในผิวหนังของแมลงและเยื่อหุ้มอวัยวะเป้าหมาย การกระตุ้น (= การมีปฏิสัมพันธ์กับเป้าหมาย) และการล้างพิษสารพิษ [57, 69].ดังนั้นการทำงานร่วมกันของยาฆ่าแมลงซึ่งส่งผลให้มีประสิทธิผลเพิ่มขึ้นของการผสมสารพิษจึงต้องมีอย่างน้อยหนึ่งประเภทเหล่านี้ เช่น การแทรกซึมที่เพิ่มขึ้น การกระตุ้นสารประกอบที่สะสมมากขึ้น หรือการล้างพิษของส่วนผสมออกฤทธิ์ที่ออกฤทธิ์ของยาฆ่าแมลงลดลงน้อยลงตัวอย่างเช่น ความทนทานต่อพลังงานจะชะลอการแทรกซึมของหนังกำพร้าผ่านหนังกำพร้าที่หนาขึ้นและการต้านทานทางชีวเคมี เช่น การเผาผลาญของยาฆ่าแมลงที่เพิ่มขึ้นซึ่งพบได้ในแมลงบางสายพันธุ์ที่ต้านทาน [70, 71]ประสิทธิภาพที่มีนัยสำคัญของ EO ในการเพิ่มความเป็นพิษของเพอร์เมทริน โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อ PMD-R อาจบ่งชี้ถึงวิธีแก้ปัญหาการดื้อยาฆ่าแมลงโดยการโต้ตอบกับกลไกการต้านทาน [57, 69, 70, 71]Tong และ Blomquist [35] สนับสนุนผลการศึกษานี้โดยแสดงให้เห็นถึงการทำงานร่วมกันระหว่าง EO และสารกำจัดศัตรูพืชสังเคราะห์อย่างไรก็ตาม มีหลักฐานของฤทธิ์ยับยั้งต่อเอนไซม์ล้างพิษ รวมถึงไซโตโครม P450 โมโนออกซีเจเนสและคาร์บอกซีเอสเทอเรส ซึ่งเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการพัฒนาความต้านทานต่อยาฆ่าแมลงแบบดั้งเดิมPBO ไม่เพียงแต่เป็นตัวยับยั้งการเผาผลาญของ cytochrome P450 monooxygenase เท่านั้น แต่ยังช่วยเพิ่มการแทรกซึมของยาฆ่าแมลงอีกด้วย ดังแสดงให้เห็นจากการใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวกในการศึกษาเสริมฤทธิ์กัน [35, 72]สิ่งที่น่าสนใจคือ 1,8-cineole หนึ่งในองค์ประกอบสำคัญที่พบในน้ำมันข่า เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่าเป็นพิษต่อแมลงชนิดต่างๆ [22, 63, 73] และได้รับรายงานว่ามีผลเสริมฤทธิ์กันในงานวิจัยด้านกิจกรรมทางชีวภาพหลายด้าน [ 74].-,75,76,77].นอกจากนี้ 1,8-cineole ร่วมกับยาหลายชนิด เช่น curcumin [78] 5-fluorouracil [79] mefenamic acid [80] และ zidovudine [81] ยังมีฤทธิ์ส่งเสริมการซึมผ่านอีกด้วยในหลอดทดลองดังนั้น บทบาทที่เป็นไปได้ของ 1,8-ซินีโอลในการออกฤทธิ์ร่วมกันของยาฆ่าแมลงไม่เพียงแต่เป็นสารออกฤทธิ์เท่านั้น แต่ยังเป็นสารเพิ่มประสิทธิภาพการแทรกซึมอีกด้วยเนื่องจากการทำงานร่วมกันกับเพอร์เมทรินมากขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับ PMD-R ผลการทำงานร่วมกันของน้ำมันข่าและน้ำมันไตรโคแซนทีสที่พบในการศึกษานี้อาจเป็นผลมาจากอันตรกิริยากับกลไกการต้านทาน กล่าวคือ เพิ่มความสามารถในการซึมผ่านของคลอรีนไพรีทรอยด์เพิ่มการกระตุ้นการทำงานของสารประกอบที่สะสมและยับยั้งเอนไซม์ล้างพิษ เช่น ไซโตโครม P450 โมโนออกซีจีเนส และคาร์บอกซีเอสเทอเรสอย่างไรก็ตาม ลักษณะเหล่านี้จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่ออธิบายบทบาทเฉพาะของ EO และสารประกอบที่แยกได้ของมัน (เพียงอย่างเดียวหรือรวมกัน) ในกลไกการทำงานร่วมกัน
ในปี พ.ศ. 2520 มีรายงานระดับการดื้อยาเพอร์เมทรินที่เพิ่มขึ้นในประชากรพาหะหลักในประเทศไทย และในช่วงหลายทศวรรษต่อมา การใช้สารเคมีไพรีทรินถูกแทนที่ด้วยสารเคมีไพรีทรอยด์อื่นๆ โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ถูกแทนที่ด้วยเดลทาเมทริน [82]อย่างไรก็ตาม การต้านทานพาหะนำโรคต่อเดลทาเมทรินและยาฆ่าแมลงประเภทอื่นๆ เป็นเรื่องปกติอย่างมากทั่วประเทศ เนื่องจากมีการใช้งานมากเกินไปและต่อเนื่อง [14, 17, 83, 84, 85, 86]เพื่อต่อสู้กับปัญหานี้ ขอแนะนำให้หมุนเวียนหรือนำยาฆ่าแมลงที่ถูกทิ้งแล้วกลับมาใช้ใหม่ ซึ่งก่อนหน้านี้มีประสิทธิภาพและเป็นพิษน้อยกว่าต่อสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เช่น เพอร์เมทรินปัจจุบัน แม้ว่าการใช้เพอร์เมทรินจะลดลงในโครงการควบคุมยุงของรัฐบาลกลางเมื่อเร็วๆ นี้ แต่การดื้อต่อเพอร์เมทรินยังคงพบได้ในประชากรยุงอาจเกิดจากการที่ยุงสัมผัสกับผลิตภัณฑ์กำจัดแมลงในครัวเรือนเชิงพาณิชย์ ซึ่งส่วนใหญ่ประกอบด้วยเพอร์เมทรินและไพรีทรอยด์อื่นๆ [14, 17]ดังนั้น การนำเพอร์เมทรินกลับมาใช้ใหม่ให้ประสบความสำเร็จจำเป็นต้องอาศัยการพัฒนาและการดำเนินกลยุทธ์เพื่อลดความต้านทานต่อพาหะนำโรคแม้ว่าน้ำมันหอมระเหยตัวใดที่ทดสอบแยกกันในการศึกษานี้มีประสิทธิภาพเท่ากับเพอร์เมทริน แต่การทำงานร่วมกันกับเพอร์เมทรินทำให้เกิดผลเสริมฤทธิ์กันอย่างน่าประทับใจนี่เป็นข้อบ่งชี้ที่น่าเป็นไปได้ว่าปฏิสัมพันธ์ของ EO กับกลไกการต้านทานส่งผลให้การรวมกันของเพอร์เมทรินกับ EO มีประสิทธิผลมากกว่ายาฆ่าแมลงหรือ EO เพียงอย่างเดียว โดยเฉพาะอย่างยิ่งกับ PMD-R Aeยุงลาย.ประโยชน์ของส่วนผสมที่เสริมฤทธิ์กันในการเพิ่มประสิทธิภาพ แม้จะใช้ยาควบคุมเวกเตอร์ในปริมาณที่ต่ำกว่า แต่ก็อาจนำไปสู่การจัดการความต้านทานที่ดีขึ้นและลดต้นทุน [33, 87]จากผลลัพธ์เหล่านี้เป็นที่น่าสังเกตว่า EO ของ A. galanga และ C. rotundus มีประสิทธิภาพมากกว่า PBO อย่างมีนัยสำคัญในการประสานความเป็นพิษของเพอร์เมทรินในสายพันธุ์ MCM-S และ PMD-R และเป็นทางเลือกที่มีศักยภาพแทนตัวช่วยการยศาสตร์แบบดั้งเดิม
EO ที่เลือกมีผลเสริมฤทธิ์กันอย่างมีนัยสำคัญในการเพิ่มความเป็นพิษของผู้ใหญ่ต่อ PMD-R Aeaegypti โดยเฉพาะน้ำมันข่า มีค่า SR สูงถึง 1233.33 ซึ่งบ่งชี้ว่า EO มีแนวโน้มกว้างไกลในการเสริมฤทธิ์กันในการเพิ่มประสิทธิภาพของเพอร์เมทรินสิ่งนี้อาจกระตุ้นการใช้ผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติที่ออกฤทธิ์ใหม่ ซึ่งเมื่อรวมกันแล้วจะสามารถเพิ่มการใช้ผลิตภัณฑ์ควบคุมยุงที่มีประสิทธิภาพสูงได้นอกจากนี้ยังเผยให้เห็นถึงศักยภาพของเอทิลีนออกไซด์ในฐานะทางเลือกเสริมในการปรับปรุงยาฆ่าแมลงแบบเก่าหรือแบบดั้งเดิมอย่างมีประสิทธิภาพ เพื่อแก้ไขปัญหาการดื้อยาที่มีอยู่ในประชากรยุงการใช้พืชพรรณที่หาได้ง่ายในโครงการควบคุมยุงไม่เพียงแต่ลดการพึ่งพาวัสดุนำเข้าและมีราคาแพงเท่านั้น แต่ยังช่วยกระตุ้นความพยายามในท้องถิ่นในการเสริมสร้างระบบสาธารณสุขอีกด้วย
ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงผลเสริมฤทธิ์กันอย่างมีนัยสำคัญที่เกิดจากการรวมกันของเอทิลีนออกไซด์และเพอร์เมทรินผลลัพธ์เน้นย้ำถึงศักยภาพของเอทิลีนออกไซด์ในฐานะการทำงานร่วมกันของพืชในการควบคุมยุง โดยเพิ่มประสิทธิภาพของเพอร์เมทรินต่อยุง โดยเฉพาะในประชากรที่ดื้อยาการพัฒนาและการวิจัยในอนาคตจะต้องมีการวิเคราะห์ทางชีวภาพที่ทำงานร่วมกันของน้ำมันข่าและน้ำมันอัลพิเนียและสารประกอบที่แยกได้ การใช้ยาฆ่าแมลงที่มีต้นกำเนิดจากธรรมชาติหรือสังเคราะห์ร่วมกับยุงหลายสายพันธุ์และระยะต่างๆ และการทดสอบความเป็นพิษต่อสิ่งมีชีวิตที่ไม่ใช่เป้าหมายการใช้เอทิลีนออกไซด์ในทางปฏิบัติเป็นทางเลือกเสริมฤทธิ์กัน
องค์การอนามัยโลก.ยุทธศาสตร์ระดับโลกในการป้องกันและควบคุมไข้เลือดออก พ.ศ. 2555-2563เจนีวา: องค์การอนามัยโลก, 2012.
ผู้ประกอบ SC, Costa F. , Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G. , และคณะไวรัสซิกา: ประวัติศาสตร์ การเกิดขึ้น ชีววิทยา และโอกาสในการควบคุมการวิจัยต้านไวรัส2016;130:69–80.
องค์การอนามัยโลก.เอกสารข้อเท็จจริงไข้เลือดออก2559 http://www.sero.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/.วันที่เข้าถึง: 20 มกราคม 2017
กรมสาธารณสุข.สถานะปัจจุบันของผู้ป่วยโรคไข้เลือดออกและไข้เลือดออกในประเทศไทย2559. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf.วันที่เข้าถึง: 6 มกราคม 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler ดีเจ35 ปีแห่งการป้องกันไข้เลือดออกและการควบคุมพาหะนำโรคในสิงคโปร์โรคติดเชื้อกะทันหัน.2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. ระบุความท้าทายและเสนอวิธีแก้ปัญหาเพื่อควบคุมพาหะไวรัส Aedes aegyptiพลอส ยา.2008;5:362–6.
ศูนย์ควบคุมและป้องกันโรค.ไข้เลือดออก กีฏวิทยา และนิเวศวิทยา2559 http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/.วันที่เข้าถึง: 6 มกราคม 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE การเปรียบเทียบฤทธิ์ในการฆ่าตัวอ่อนของใบ เปลือก ลำต้น และรากของ Jatropa curcas (Euphorbiaceae) กับพาหะนำโรคมาลาเรีย ยุงก้นปล่อง gambiaeSZhBR.2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. ลักษณะที่อยู่อาศัยของตัวอ่อนยุงก้นปล่องในพื้นที่โรคมาลาเรียของโครงการกำจัดโรคมาลาเรียทางตะวันออกเฉียงใต้ของอิหร่านเอเชียแปซิฟิก เจ ทรอป ไบโอเมด2014;4(อาหารเสริม 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. ทบทวนแนวทางการควบคุมเวกเตอร์ การป้องกัน และการควบคุมการระบาดของไวรัสเวสต์ไนล์ และความท้าทายที่ยุโรปเผชิญเวกเตอร์ปรสิต2014;7:323.
Muthusamy R. , Shivakumar MS Selection และกลไกระดับโมเลกุลของการต้านทานไซเปอร์เมทรินในหนอนผีเสื้อสีแดง (Amsacta albistriga Walker)สรีรวิทยาทางชีวเคมีของศัตรูพืช2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Laboratory การศึกษาความต้านทานต่อเพอร์เมทรินและการต้านทานข้ามของ Culex quinquefasciatus ต่อยาฆ่าแมลงชนิดอื่นศูนย์วิจัยพาลาสเตอร์2015;114:2553–60.
มัตสึนากะ เอส, ฮัทสัน ดีเอช, เมอร์ฟี่ เอสดี.เคมีของสารกำจัดศัตรูพืช: สวัสดิภาพมนุษย์และสิ่งแวดล้อม เล่มที่3: กลไกการออกฤทธิ์ เมแทบอลิซึม และพิษวิทยานิวยอร์ก: Pergamon Press, 1983
ต.เจริญวิริยภาพ, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. การทบทวนการดื้อยาฆ่าแมลงและการหลีกเลี่ยงพฤติกรรมของพาหะนำโรคในมนุษย์ในประเทศไทยเวกเตอร์ปรสิต2013;6:280.
ต.เจริญวิริยภาพ, อั้ม-อ่อง บี, ส.รัตนธรรม. รูปแบบการดื้อยาฆ่าแมลงในปัจจุบันของพาหะยุงในประเทศไทยเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ J Trop Med สาธารณสุข.1999;30:184-94.
ต.เจริญวิริยภาพ, บังส์ เอ็มเจ, ส.รัตนธรรม ส. สถานะโรคมาลาเรียในประเทศไทยเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ J Trop Med สาธารณสุข.2000;31:225–37.
เพลินทรัพย์ เอส, เจสายงาม, ยาโนล่า เจ, ลำจวน เอ็น, ทิพย์วรรณโกศล, วอลตัน เอส, สมบูรณ์ พี. ความถี่ชั่วคราวของการกลายพันธุ์ต้านทานการน็อคดาวน์ของ F1534C และ V1016G ในยุงลายยุงลายในจังหวัดเชียงใหม่ ประเทศไทย และผลกระทบของการกลายพันธุ์ต่อประสิทธิภาพของสเปรย์พ่นหมอกความร้อน ที่มีสารไพรีทรอยด์อัคทาทรอป.2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. การดื้อยาฆ่าแมลงในพาหะไข้เลือดออกหลัก Aedes albopictus และ Aedes aegyptiสรีรวิทยาทางชีวเคมีของศัตรูพืช2012;104:126–31.